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Isolation, characterization, and perspectives of use of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) from children with cleft lip and palate

Mayara Bringel dos Santos Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado

2021

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  • Título:
    Isolation, characterization, and perspectives of use of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) from children with cleft lip and palate
  • Autor: Mayara Bringel dos Santos
  • Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado
  • Assuntos: DENTE DECÍDUO -- CITOLOGIA; CÉLULAS-TRONCO -- TRANSPLANTE; FISSURA LÁBIOPALATINA -- TERAPIA; CITOMETRIA DE FLUXO; Células-Tronco Mesenquimais; Cleft Lip; Cleft Palate; Engenharia Tecidual; Fissua Labial; Fissura Palatina; Mesenchymal Stem Cells; Tissue Engineering
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: Esta tese teve como objetivo apresentar dois artigos científicos. O Artigo 1, aborda uma revisão de estudos utilizando células-tronco de dentes decíduos humanos esfoliados (SHEDs) na regeneração óssea, salientando o uso em pacientes com fissuras labiopalatinas (FLP) e o Artigo 2, objetivou comparar a caracterização de SHED entre crianças com e sem fissuras labiopalatinas, a fim de analisar se as SHEDs autólogas podem ser consideradas uma opção para que, em breve, possam ser utilizadas para fins terapêuticos, como uma alternativa na reconstrução de fissuras alveolares em pacientes com FLP. No Artigo 1, foi possível observar que estudos in vitro e in vivo estão sendo realizados para que a regeneração óssea seja feita utilizando materiais não invasivos, com o uso de scaffolds e células-tronco como as SHEDs. Estudos in vivo mostraram que a SHED pode induzir a formação óssea, produzir dentina e expressar marcadores neuronais. No entanto, apesar de muitos esforços já feitos, por ser uma alternativa promissora que pode trazer benefícios para o tratamento e para a qualidade de vida de diversos pacientes, ainda há poucos relatos na literatura de aplicabilidade, principalmente em pacientes com FLP. No Artigo 2, tecidos pulpares foram obtidos de 6 dentes decíduos hígidos em estágio de esfoliação, de 6 doadores com idade entre 4 e 12 anos e divididos em dois grupos, sem fissura labiopalatina (Grupo Controle) e com fissura labiopalatina (Grupo Fissura). As células obtidas por cultura primária foram analisadas imunofenotipicamente, onde as que apresentaram expressões positivas dos marcadores de superfície celular CD105, CD73, CD90 e negativas de CD45, CD34, CD11b, CD19, HLA-DR (PE) foram coletadas após separação em Citometria de Fluxo. As células foram submetidas à diferenciação multilinhagem e foram analisadas morfologicamente. A diferença imunofenotípica entre
    os grupos foi analisada pelo teste t de Student e o nível de significância foi estabelecido em 5% (p <0,05). Foi demonstrada adesão plástica, e altos níveis de marcadores CTM foram identificados em ambos os grupos, com expressão positiva de CD105, CD73 e CD90 (≥95% positivo) e ausência de marcadores de linhagem hematopoiética CD45, CD34, CD11b, CD19 e HLA-DR (≤2% positivo). As células pulpares isoladas em todas as amostras demonstraram capacidade de diferenciação adipogênica, osteogênica e condrogênica. A análise morfológica identificou núcleo ligeiramente menor e capacidade proliferativa menor no tempo avaliado no grupo Fissura. Houve diferença estatisticamente significante (p = 0,042) na comparação das SHEDs obtidas após sorting nos dois grupos, sendo maior no grupo Fissura. Após a confirmação dos critérios padrão para definição de CTM multipotentes em ambos os grupos, foi possível confirmar o isolamento e a caracterização de SHED em todas as amostras. Esse achado sugere que SHEDs de crianças com FLP podem ser consideradas uma opção para investigações futuras sobre o uso autólogo de células em intervenção terapêutica. Não obstante, estudos futuros ainda são necessários para avaliar possíveis diferenças internas entre as células, analisar a curva de crescimento entre os grupos e quantificar a diferenciação osteogênica, visando identificar se a fissura poderia favorecer a regeneração óssea por meio da engenharia de tecidos.
  • Data de criação/publicação: 2021
  • Formato: 74 p.
  • Idioma: Inglês
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