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Investigação da morte de células B16F10 in vitro com associação de radioterapia e terapia fotodinâmica

Lopes, Raphael Guimarães

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Física de São Carlos 2024-02-20

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Investigação da morte de células B16F10 in vitro com associação de radioterapia e terapia fotodinâmica
  • Autor: Lopes, Raphael Guimarães
  • Orientador: Inada, Natalia Mayumi
  • Assuntos: Apoptose; Melanoma; Radioterapia; Terapia Fotodinâmica; Apoptosis; Photodynamic Therapy; Radiotherapy
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: O melanoma, um carcinoma cutâneo que afeta os melanócitos produtores de melanina, é notório por sua elevada propensão à metástase, resultando em baixa sobrevida aos pacientes. Terapias convencionais como cirurgia, quimioterapia, radioterapia e imunoterapia, enfrentam desafios devido à resistência tumoral. A radioterapia (RT) e a terapia fotodinâmica (TFD) são modalidades médicas voltadas para a eliminação de tumores primários e sabe-se que associadas com a imunoterapia, podem potencializar a resposta tumoral através de mecanismos de morte celular imunogênica. Esta pesquisa avaliou a morte de células de melanoma murino B16F10 in vitro após aplicação isolada e/ou combinada de RT e TFD. Utilizouse a clorina comercial Photoditazine® (PDZ) como fotossensibilizador (FS) irradiada em 660 nm. Fluências de 2, 6 e 20 J/cm2 foram testadas na fase de padronização dos grupos submetidos à TFD, com as concentrações de PDZ de 1, 5, 10 e 20 μg/ml com 1 hora de incubação no escuro e avaliadas pelo ensaio de atividade metabólica 24 horas. Os parâmetros dos grupos experimentais para a associação de RT e TFD foram: dose de RT de 4 Gy, TFD com fluência de 2 J/cm2 e PDZ na concentração de 5 μg/ml com 1 hora de incubação prévia no escuro. Os intervalos testados entre terapias foram de 1, 4, 24 e 48 horas para as análises da atividade metabólica relativa e os tempos de 24 e 48 horas após a última terapia para a análise da morte celular por citometria de fluxo. Foi observado que a combinação das terapias em intervalos mais longos favoreceu o sinergismo, sendo o grupo RT+TFD com 48 horas de intervalo entre as terapias e análise 24 horas após o mais eficiente, com taxa de morte celular por apoptose de 37,02%. A ordem de aplicação das terapias também demonstrou ser um fator determinante, com a sequência RT+TFD demonstrando maior eficácia na indução de morte celular apoptótica no mesmo protocolo de tempos entre terapias e análise, comparando com a ordem inversa (TFD+RT), que apresentou uma taxa apoptótica de apenas 11,22%. O presente estudo revelou avanços significativos na busca por estratégias terapêuticas eficazes contra o melanoma, destacando a combinação da Radioterapia e Terapia Fotodinâmica como uma abordagem especialmente promissora para o intervalo de 48 horas. O protocolo RT e TFD, com intervalo 48 horas, destaca potencial imunogênico ao induzir importante morte apoptótica, sugerindo estimulação da resposta imunológica. Apesar dos avanços, há necessidade de investigações adicionais para compreender os mecanismos subjacentes, especialmente na relação entre TFD, ciclo celular e resposta imunogênica. A continuidade da pesquisa visa contribuir para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas inovadoras contra o melanoma.
  • DOI: 10.11606/D.76.2024.tde-24042024-102621
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Física de São Carlos
  • Data de criação/publicação: 2024-02-20
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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