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Aspectos bioquímicos e genéticos relacionados à conversão direta de ápices radiculares de Catasetum fimbriatum em Protocornóides

Liane Terezinha Dorneles Gilberto Barbante Kerbauy

1998

Localização: IB - Instituto de Biociências    (D-706 )(Acessar)

  • Título:
    Aspectos bioquímicos e genéticos relacionados à conversão direta de ápices radiculares de Catasetum fimbriatum em Protocornóides
  • Autor: Liane Terezinha Dorneles
  • Gilberto Barbante Kerbauy
  • Assuntos: BOTÂNICA
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: Procurou-se por meio do presente estudo evidenciar alguns processos bioquímicos e genéticos relacionados a conversão de ápices radiculres de Catasetum fimbriatum em protocormóides na presença de 2iP. Para tal, analisou-se o teor de proteína total e a atividade da AIA-oxidase durante este processo de regeneração. Pôde-se observar uma diminuição no teor protéico e na atividade desta enzima até 96 horas do início do processo de incubação. Decorrido este período, observou-se uma retomada tanto do teor protéico quanto da atividade da AIA-oxidase, provavelmente decorrente da reorganização gênica necessária à conversão das raízes. Embasados neste resultados construiu-se um biblioteca de cDNA (título de 4 x '10 POT.5' u.f.p.). O cDNA foi sintetizado a partir do RNA mensageiro dos ápices radiculares na condição controle e dos ápices induzidos a formação de protocormóides por 10 dias em meio contendo 2iP. O cDNA foi ligado em braços do vetor 'lâmbda'gt 10 Eco RI gerando uma biblioteca. A triagem diferencial desta biblioteca possibilitou o isolamento de quinze clones, nove deles preferencialmente presentes no processo induzido à formação de gemas. O seqüenciamento dos clones revelou que pelo menos dois deles eram idênticos. A partir de então, por meio do emprego de endonucleases de restrição, caracterizou-se a presença do clone 31 no genôma de C.fimbriatum. O DNA de outras espécies de órquídeas Oncidium varicosum, Psygmorchis pussila, Cycnoches pentadactilum e também Arabidopsis
    thaliana, foram estudadas através de "southren blot" dentro de condições estringentes e indicaram uma ampla conservação do clone 31. Em estudos posteriores foi demostrado que a expressão desse gene aumentava durante o processo de conversão dos ápices radiculares em portocormóides, principalmente no décimo dia. Uma expressão basal do clone 31 foi também observada em folhas incubadas na presença de luz e raízes crescidas no escuro
  • Data de criação/publicação: 1998
  • Formato: 98 p.
  • Idioma: Português

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