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Efecto de enterotoxina termo-estable de E. coli sobre el intercambiador NA+/H+ en células T84 papel da angiotensina II, staurosporina, 8-BR-AMPC e H89

G A R Béltran M A Ramirez; N A Rebouças; Gerhard Malnic; Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV (2002 São Paulo)

Resumos São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002

São Paulo Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP 2002

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  • Título:
    Efecto de enterotoxina termo-estable de E. coli sobre el intercambiador NA+/H+ en células T84 papel da angiotensina II, staurosporina, 8-BR-AMPC e H89
  • Autor: G A R Béltran
  • M A Ramirez; N A Rebouças; Gerhard Malnic; Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV (2002 São Paulo)
  • Assuntos: FISIOLOGIA
  • É parte de: Resumos São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2002
  • Descrição: Células T84, derivadas desde un cancer colónico humano, han sido utilizadas como un modelo de células intestinais para el estudio del transporte de agua y electrolitos. Es conocido que la toxina de E. coli termo-estable aumenta la secreción de Cl- y reduce la absorción de NaCl, mas no se tiene claridad de como son afectados los transportadores ácido-base. Nuestro objetivo es evaluar como Sta afecta la actividad del intercambiador Na+/H+, y posibles vías intracelulares involucradas. Células T84 fueron cultivadas en láminas de vidrio. Una vez confluentes fueron incubadas en solución Ringer-HEPES, nominalmente libre de HCO-3/CO2 y cargadas com el fluorescente BCECF-AM. El pH celular fue medido por microscopía de fluorescencia. Bajo condiciones control, el pH celular fue de 7,17 ± 0,011 (n=12). Después de un pulso ácido com NH4Cl (20mM), el pH recuperó com una velocidad de 0,13 ± 0,008 unidades de pH/min. En presencia de HOE-694 (25mM), un inhibidor de NHE-1 y NHE-2, la velocidad de recuperación fue de 0,056 ± 0,0035 (n=14) unidades de pH/min. La isoforma remanecente no es la forma clásica de NHE-3, que no fue detectada por Western Blot y RT-PCR Esta isoforma (NHE-?) es modulada por cloruro, siendo que su velocidad de recuperación fue aumentada significativamente con respecto al valor control. Cuando las células fueron preincubadas por 30 minutos en Ringer-HEPES conteniendo 0,25 mM de Sta, la velocidad de recuperación después del pulso ácido, en
    presencia de HOE-694 25mM, fue de 0,012 ± 0,0096 (n=5) unidades de pH/min. Esta respuesta fue revertida cuando las células fueron expuestas al inhibidor de la PKA, H89 10-4M (0,052 ± 0,0065 unidades de pH/min, n=5). Células T84 presentan un intercambiador Na+/H+, regulado por cloruro, sugiriendo la participación de canales de Cl, provablemente del tipo CFTR. Además demostramos que la actividad de este intercambiador es reducida por Sta vía PKA
  • Editor: São Paulo Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
  • Data de criação/publicação: 2002
  • Formato: 1. (várias paginações) poster 243.; Disponível em CD-ROM.
  • Idioma: Espanhol
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