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Vetores adenovirais para a complementação de células humanas deficientes em reparo de DNA

M. C. N Marchetto A R Muotri; Carlos Frederico Martins Menck; Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas (3. 2001 São Paulo)

Resumos São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2001

São Paulo Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP 2001

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  • Título:
    Vetores adenovirais para a complementação de células humanas deficientes em reparo de DNA
  • Autor: M. C. N Marchetto
  • A R Muotri; Carlos Frederico Martins Menck; Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas (3. 2001 São Paulo)
  • Assuntos: MICROBIOLOGIA
  • É parte de: Resumos São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2001
  • Descrição: Pacientes com a síndrome humana xeroderma pigmentosum (XP) têm um alto grau de fotossensibilidade em locais da pele expostos à luz solar. Grande parte dos pacientes XP carrega mutações no gene xpc. A proteína codificada pelo gene xpc atua diretamente no reparo do genoma global, durante o reconhecimento do dano no DNA, induzido por luz ultravioleta UV, no início do reparo por excisão de nucleotídeos (NER). Objetivos: utilização de vetores adenovirais para complementação de células humanas deficientes em reparo de DNA (xpc-). Métodos e resultados: O cDNA do gene xpc foi clonado em um vetor ponte (pShuttle) para a construção de um adenovirus recombinante. O vetor resultante, pSHUC, foi duplamente digerido com as enzimas de restrição raras e transferido para o plasmídeo backbone de adenovirus pAdeno-X, através de uma reação de ligação in vitro. Então, o plasmídeo adenoviral foi empacotado em partículas infecciosas através da transfecção em células HEK (human embryonic kidney cells) 293. O vírus recombinante obtido (AdXPC) foi usado para infectar células xpc-, deficientes em reparo de DNA, que foram então testadas para sensibilidade frente à luz UV. Conclusão: Uma vez que a eficiência de transdução do AdXPC for comprovada, ele será utilizado para obter uma complementação transiente em células primárias de pacientes XP. Isso constituirá em um novo enfoque de terapia gênica para a reconstituição dos mecanismos de reparo de DNA nesses indivíduos
  • Editor: São Paulo Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
  • Data de criação/publicação: 2001
  • Formato: 1 v., pôster 220.
  • Idioma: Português

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