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O papel dos receptores nucleares AmFTZ-F1 e EcR no desenvolvimento pupal de Apis mellifera

Rathyana Rachel Palo Mello Zilá Luz Paulino Simões

2013

Localização: FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto    (Mello, Rathyana Rachel Palo )(Acessar)

  • Título:
    O papel dos receptores nucleares AmFTZ-F1 e EcR no desenvolvimento pupal de Apis mellifera
  • Autor: Rathyana Rachel Palo Mello
  • Zilá Luz Paulino Simões
  • Assuntos: ABELHAS; SEQUENCIAMENTO GENÉTICO
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: O desenvolvimento de insetos e a metamorfose são processos controlados por mecanismos complexos desencadeados pela ação hormonal, principalmente dos ecdisteróides e do hormônio juvenil (HJ). Os hormônios aluam por meio de moléculas mediadoras, os fatores de transcrição, que são capazes de se ligarem a regiões reguladoras dos genes alvos. Dentre os fatores de transcrição, os receptores nucleares formam uma família que inclui os membros FTZ-F1 e EcR. Sugere-se que FTZ-F1 seja importante na aquisição de competência para as repostos a 20-hidroxiecdisona (20E) no período da metamorfose, além de possivelmente formar um complexo com HJ e seu provável receptor Met. Além disso, FTZ-F1 também participa na regulação da expressão do gene codificador da Vitelogenina (Vg) em Aedes aegypti, portanto, de alguma forma está relacionado à reprodução, já que Vg é essencial para o desenvolvimento do embrião. Em nossos estudos anteriores, demonstramos que a expressão de ftz-f1 em A. mellifera (Amftz-f1) ocorre em momentos de baixos títulos de ecdisona, da mesma forma que em D. melanogaster, e essa característica é comum em moléculas envolvidas na aquisição de competência para ação de hormônios (no caso, 20E). E o knockdown de Amftz-f1 em pupas provocou a queda nos níveis de transcritos de vg. EcR é o receptor de 20E e atua como heterodímero juntamente com ultraspiracle (USP). Participa de muitas vias das quais FTZ-F1 também faz parte. A mais estudada é a que leva à metamorfose. No presente estudo nos propusemos a avaliar os alvos de FTZ-F1 e EcR no período pupal do desenvolvimento de A. mellifera, pois não havia muitas informações sobre a atuação desses receptores fora do contexto da metamorfose.Também determinamos o perfil de expressão de Amftz-f1 no desenvolvimento pupal de zangões, que era desconhecido. Analisamos os efeitos do knockdown de vg sobre a expressão de Amftz-f1
    e dos principais hormônios morfogenéticos sobre a expressão de Amftz-f1 e EcR Além disso, fizemos uma predição de microRNAs reguladores da expressão desses dois receptores nucleares. Observamos que HJ ativa a expressão de Amftz-f1 e o knockdown de vg leva ao efeito contrário. Acreditamos que, assim como acontece em D. melanogaster, AmFTZ-F1 pode formar um complexo com HJ e seu receptor, e o aumento de HJ levaria a um feedback positivo sobre a expressão de Amftz-f1. Esse complexo ativaria a expressão de genes alvo, como vg. E, no caso de vg, ocorreria um mecanismo de feedback negativo que levaria a diminuição da transcrição de Amftz-f1. Observamos que Amftz-f1 é expresso em pupas de zangões com um perfil semelhante ao apresentado em operarias e rainhas. Ocorrem picos de expressão antes da metamorfose a antes da muda pupa-adulto, sugerindo uma participação desse fator nesses processos. Observamos um pico de expressão em uma fase de pré-pupa que apresenta altos níveis de 20E, sugerindo que a regulação de Amftz-f1 por este hormônio em zangões pode ser diferente da regulação em operarias e rainhas. O knockdown de Amftz-f1 alterou a expressão de 76 genes. A classe funcional relacionada a metabolismo foi a mais representativa. Foram encontrados 7 genes diferencialmente expressos que codificam constituintes estruturais da cutícula, genes expressos no cérebro e o gene similar a yellow-d de D. melanogaster. Por análises de bioinformática, identificamos alguns miRNAs preditos como reguladores de Amftzf1 e EcR de A. mellifera e verificamos que existem vinte miRNAs que possivelmente corregulam a expressão desses genes. Além disso, observamos que as isoformas de EcR não sofrem efeito da aplicação de HJ, e a alteração nos níveis de 20E inibe EcR-B. O knockdown de EcR levou a alterações na expressão de 67 genes, destacando-se diversos membros da família citocromo P450 (CYP), major
    royal jelly proteins (mrjp) e genes cuticulares, além de ter modificado a expressão de seis miRNAs envolvidos em processos como a regulação da apoptose, desenvolvimento do sistema nervoso e da musculatura. Portanto, este estudo demonstrou que além de serem importantes para a metamorfose, AmFTZ-F1 e EcR regulam as diversas modificações que ocorrem no período pupal de A. mellifera e que permitem às abelhas vencer todos os processos que acontecem na passagem do período larval até a fase adulta
  • Data de criação/publicação: 2013
  • Formato: 162 p anexos.
  • Idioma: Português
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