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Comparative studies of Yersinia pestis outer membrane isolation techniques and their potential use in plague epidemiology

ABATH, F. G. C ; FERREIRA, L. C. DE S

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, 1990-04, Vol.32 (2), p.78-83 [Periódico revisado por pares]

São Paulo: Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

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  • Título:
    Comparative studies of Yersinia pestis outer membrane isolation techniques and their potential use in plague epidemiology
  • Autor: ABATH, F. G. C ; FERREIRA, L. C. DE S
  • Assuntos: Biological and medical sciences ; Cell membranes. Ionic channels. Membrane pores ; Cell structures and functions ; Fundamental and applied biological sciences. Psychology ; Molecular and cellular biology ; TROPICAL MEDICINE
  • É parte de: Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, 1990-04, Vol.32 (2), p.78-83
  • Descrição: In the present study three techniques for obtaining outer membrane enriched fractions from Yersinia pestis were evaluated. The techniques analysed were: differential solubilization of the cytoplasmic membrane with Sarkosyl or Triton X-100, and centrifugation in sucrose density gradients. The sodium dodecyl-sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) of outer membrane isolated by the different methods resulted in similar protein patterns. The measurement of NADH-dehydrogenase and succinate dehydrogenase (inner membrane enzymes) indicated that the outer membrane preparations obtained by the three methods were pure enough for analytical studies. In addition, preliminary evidences on the potential use of outer membrane proteins for the identification of geographic variants of Y. pestis wild isolates are presented. No presente estudo três técnicas para isolamento de frações enriquecidas em membrana externa de Y. pestis foram avaliadas. As técnicas utilizadas foram: centrifugação em gradiente de densidade em sacarose e solubilização diferencial com Sarkosyl ou Triton X-100. A análise por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) das membranas externas extraídas pelos diferentes métodos evidenciou perfis protéicos semelhantes. A determinação das atividades de NADH-desidrogenase e succinato-desidrogenase (enzimas de membrana interna) indicou que todas as preparações estudadas eram adequadas a estudos analíticos. Obteve-se evidências preliminares sobre o possível uso de perfis protéicos de membrana externa na identificação de variantes geográficos entre isolados selvagens de Y. pestis.
  • Editor: São Paulo: Instituto de Medicina Tropical de São Paulo
  • Idioma: Inglês;Português
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