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Vias de sinalização envolvidas na ação da AVP sobre o trocador 'Na POT.+'/'H POT.+' em células epiteliais colônicas

Raif Musa-Aziz O Beloto-Silva; Margarida de Mello Aires; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE (19. 2004 Águas de Lindóia, SP)

Resumos Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2004

Águas de Lindóia 2004

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  • Título:
    Vias de sinalização envolvidas na ação da AVP sobre o trocador 'Na POT.+'/'H POT.+' em células epiteliais colônicas
  • Autor: Raif Musa-Aziz
  • O Beloto-Silva; Margarida de Mello Aires; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE (19. 2004 Águas de Lindóia, SP)
  • Assuntos: FISIOLOGIA
  • É parte de: Resumos Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2004
  • Notas Locais: Disponível somente em CD-ROM
  • Descrição: Objetivo: O presente estudo verifica as vias de sinalização intracelular envolvidas no efeito da Arginina Vasopressina (AVP) sobre a velocidade de recuperação do pH intracelular, mediada pelo trocador Na+/H+, em células epiteliais colônicas (T84). Métodos e Resultados: As medidas de pH intracellular (pHi) e cálcio citosólico ([Ca2+]i) são feitas por microscopia de fluorescência, através das sondas intracelulares, BCECF-AM e Fluo 4-AM, respectivamente, em monocamadas de células, sobre lamínulas de vidro. Para analisar a recuperação do pHi, avaliamos a velocidade de extrusão celular de H+ nos dois primeiros minutos (dpHi/dt) após pulso ácido por NH4Cl, na vigência de solução externa controle ou experimental. Nossos experimentos revelam que as células T84 apresentam pHi basal inicial de 7.18±0.001 (n=52) e dpHi/dt controle de 0.12±0.001 (n=52). A velocidade de recuperação do pHi aumenta na presença de AVP (10-12 - 10-9 M) e diminui com AVP (10-8 - 10-6 M). A adição de Staurosporine (10-5 M; inibidor da PKC) reduz o efeito estimulador da AVP (10-10 M) e não altera o efeito inibidor da AVP (10-6 M). W13 (10-5 M; inibidor do complexo Ca2+-calmodulina quinase) reduz o efeito estimulador da AVP (10-10 M) e reverte o efeito inibidor da AVP (10-6 M). H89 (10-4 M; inibidor da PKA) não altera o efeito estimulador da AVP (10-10 M) mas reduz o efeito inibidor da AVP (10-6 M). A AVP (10-12 - 10-6 M) eleva a [Ca2+]i em relação ao grupo controle [97±1 (n=32)],
    sendo este efeito dose-dependente. A adição de Staurosporine, W13 ou H89 não altera o efeito estimulador da AVP sobre a [Ca2+]i. Conclusões: Nossos resultados indicam que nas células epiteliais colônicas, PKC, cálcio citosólico (via complexo Ca2+-calmodulina quinase) e PKA são fatores moduladores do efeito bifásico da AVP sobre a atividade do trocador Na+/H+.
  • Editor: Águas de Lindóia
  • Data de criação/publicação: 2004
  • Formato: res. 20.006.
  • Idioma: Português
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