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Efeito agudo do peptídeo-1 semelhante ao glucagon (glp-1) sobre o trocador na+/h+ (nhe3) em células de túbulo proximal renal

L. R. Carraro-Lacroix Gerhard Malnic; Adriana Castello Costa Girardi; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE (24. 2009 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Biofísica (SBBf) (34. 2009 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Fisiologia (SBFis) (44. 2009 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Investigação Clínica (SBIC) (25. 2009 Águas de Lindóia); Congresso Brasileiro de Neurociências e Comportamento (SBNeC) (33. 2009 Águas de Lindóia); Congress of the Brazilian Research Association in Vision and Ophthalmology (BRAVO) (6. 2009 Águas de Lindóia)

Programa Águas de Lindóia, 2009

Águas de Lindóia 2009

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  • Título:
    Efeito agudo do peptídeo-1 semelhante ao glucagon (glp-1) sobre o trocador na+/h+ (nhe3) em células de túbulo proximal renal
  • Autor: L. R. Carraro-Lacroix
  • Gerhard Malnic; Adriana Castello Costa Girardi; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE (24. 2009 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Biofísica (SBBf) (34. 2009 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Fisiologia (SBFis) (44. 2009 Águas de Lindóia); Congresso da Sociedade Brasileira de Investigação Clínica (SBIC) (25. 2009 Águas de Lindóia); Congresso Brasileiro de Neurociências e Comportamento (SBNeC) (33. 2009 Águas de Lindóia); Congress of the Brazilian Research Association in Vision and Ophthalmology (BRAVO) (6. 2009 Águas de Lindóia)
  • Assuntos: FISIOLOGIA
  • É parte de: Programa Águas de Lindóia, 2009
  • Descrição: OBJETIVOS:Descreveu-se recentemente que GLP-1 promove natriurese em ratos e humanos devido à diminuição da reabsorção de sódio acompanhada do decréscimo da secreção de hidrogênio. Estes dados sugerem que GLP-1 inibe a atividade do trocador Na/H NHE3 em células de túbulos proximais renais. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito do GLP-1 sobre a atividade do trocador NHE3 em células de túbulo proximal, as vias de sinalização envolvidas, bem como os mecanismos moleculares responsáveis por mediar este efeito.MÉTODO:Com este propósito, o pH intracelular (pHi) foi medido em monocamadas de células cultivadas sobre suportes impermeáveis utilizando o marcador sensível a pH, BCECF. Dessa forma, medidas da atividade do NHE3 foram realizadas após sobrecarga ácida com NH4Cl pela avaliação da velocidade de recuperação do pHi (dpHi/dt) em células pré-incubadas por 30 minutos com 500 pM Exendin-4 (agonista do receptor de GLP-1, GLP-1R) ou inibidores.RESULTADOS:Observamos que a velocidade de recuperação do pHi dependente de NHE3 (0.24 ± 0.02 unidades de pH/min, n = 16) foi significativamente reduzida na presença de Exendin-4 (0.12 ± 0.01 unidades de pH/min, n = 14). Tal efeito inibitório foi M 8-Br-AMPc, um análogo de AMPc. Nenhum efeito mimetizado por 100 aditivo foi observado na presença de ambos Exendin-4 e 8-Br-AMPc. )Por outro lado, o inibidor de PKA (proteína cinase A), H89, preveniu parcialmente a inibição de NHE3 por Exendin-4. A inibição do NHE3
    promovida por Exendin-4 também foi parcialmente reduzida na presença de U0126, inibidor de MEK1/MEK2, que inibe a cascata de sinalização à jusante de EPAC (proteína diretamente ativada por AMPc). Além disso, quando as células foram tratadas simultaneamente com Exendin-4 e análogos de AMPc que seletivamente ativam PKA ou EPAC, nenhum efeito sinérgico foi observado. Experimentos de immunoblotting utilizando anticorpos fosfoespecíficos demonstraram que a inibição da troca Na+/H+ por Exendin-4 estava associada com um aumento significativo dos níveis de fosforilação do trocador (65 ± 11%; n = 3, P < 0,05). Tal efeito foi totalmente bloqueado pela adição de H89.CONCLUSÃO:Em conjunto, estes dados sugerem que a inibição da atividade do NHE3 por Exendin-4 é mediada por cAMP e conseqüente ativação das vias da PKA e EPAC. A ativação da PKA resulta em fosforilação do trocador NHE3. O mecanismo molecular pelo qual EPAC modula a atividade do NHE3 ainda não foi estabelecido.
  • Editor: Águas de Lindóia
  • Data de criação/publicação: 2009
  • Formato: res. 13.016.
  • Idioma: Português
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