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Incremento da atividade anti-helmíntica da Ivermectina pela ação sinérgica de compostos fitoquímicos sob isolados de Haemonchus contortus susceptível e resistente a anti-helmínticos

Pacheco, Poliana Araujo

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Centro de Energia Nuclear na Agricultura 2023-01-10

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  • Title:
    Incremento da atividade anti-helmíntica da Ivermectina pela ação sinérgica de compostos fitoquímicos sob isolados de Haemonchus contortus susceptível e resistente a anti-helmínticos
  • Author: Pacheco, Poliana Araujo
  • Supervisor: Katiki, Luciana Morita; Louvandini, Helder
  • Subjects: Compostos Fenólicos; Pgp; Haemonchus Contortus; Óleos Essenciais; Ivermectina; Limoneno; Limonene; Ivermectin; Essential Oil; Phenolic Compounds
  • Notes: Tese (Doutorado)
  • Description: Os fitoquímicos podem aumentar o efeito da ivermectina (IVM) através da modulação da atividade da glicoproteína P (PgP), uma proteína de transporte transmembrana que livra as células de nematóides como o Haemonchus contortus de moléculas tóxicas e considerado um dos principais mecanismos de resistência à IVM. Uma triagem completa foi proposta para verificar a interação entre IVM e fitoquímicos. A primeira etapa deste estudo foi avaliar e comparar a atividade anti-helmíntica de IVM isolada ou combinada com os principais componentes de óleos essenciais (alfa terpineno, beta citronelol, beta pineno, citronelal, limoneno, mentol e terpinoleno) e compostos fenólicos (epicatequina, epigalocatequina, gallocatequina pentagaloilglicose, procianidina e quercetina). Todos os compostos foram testados contra isolados suscetíveis (HcS) e resistentes (HcR) de H. contortus através do teste de desenvolvimento larval (TDL), teste de motilidade de adultos (TMA) e análise de expressão de PGP de vermes adultos por RT-PCR, usando verapamil (VP), conhecido modulador de PgP, como controle em todos os testes. No TDL, a concentração letal de IVM necessária para matar 50% dos nematóides (LC50) foi 10 vezes maior para HcR do que para HcS. IVM + VP inibiu a atividade de PgP em HcR. IVM + limoneno e IVM + quercetina mostraram-se semelhantes a IVM+VP e foram escolhidos para testes subsequentes. No AMT, IVM + VP em HcR foram semelhantes a IVM + limoneno e superaram IVM + quercetina. Na expressão gênica de vermes HcR expostos a IVM, IVM+VP e IVM + limoneno, para a maioria das concentrações avaliadas, PGP-9 foi significativamente mais expresso em vermes tratados com IVM isolada do que em vermes tratados com IVM + VP ou IVM + limoneno. Em conclusão, o limoneno está envolvido na modulação do gene PGP-9 e restaurou a atividade de IVM no isolado HcR. Na última etapa foi proposto um experimento in vivo para verificar a interação entre o limoneno fornecido na dieta com o concentrado e uma etapa de vermifugação com dose única de ivermectina oral (1 mL/4kg/PV) em 24 cordeiros Dorper com aproximadamente 5 meses de idade infectados artificialmente com uma isolado resistente de H. contortus e distribuídos em 4 tratamentos: CONTROLE, LIMO (limoneno - 200 mg/kg/PV/dia), LIVM (limoneno + ivermectina - 200 mg/kg/PV/dia + dose única 1 mL de Ivermectina /4kg PV), IVM (1 mL/4kg PV). Foram coletadas amostras de fezes e sangue durante o período experimental e após 14 dias da administração da IVM aos respectivos tratamentos, todos os animais foram eutanasiados para contagem do total de vermes presentes no abomaso, avaliação de medidas morfométricas de machos e fêmeas, fertilidade das fêmeas. Não foram observadas diferenças nas contagens de vermes e parâmetros de comprimento de machos e fêmeas, nos tratamentos. No entanto, a fertilidade das fêmeas foi afetada, pois observamos diferenças estatísticas entre CONTROLE e LIMO e LIMO e LIVM. Sobre o FEC, o LIVM e o LIMO diferiram entre si e o IVM foi igual ao CONTROLE. LIVM diferiu do controle e IVM, IVM diferiu apenas de LIVM. O uso do limoneno associado a ivermectina pode ser uma alternativa de controle ao uso único de anti-helmínticos na pecuária, sendo importante detacar a necessidade de mais pesquisas de validação
  • DOI: 10.11606/T.64.2023.tde-31102023-094720
  • Publisher: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Centro de Energia Nuclear na Agricultura
  • Creation Date: 2023-01-10
  • Format: Adobe PDF
  • Language: Portuguese
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