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Isolamento do transportador de trealose de Saccharomyces cerevisiae

Silva, Cleonice Da

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química 1999-04-12

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Isolamento do transportador de trealose de Saccharomyces cerevisiae
  • Autor: Silva, Cleonice Da
  • Orientador: De Araujo, Pedro Soares
  • Assuntos: Biologia Molecular; Proteina De Membrana; Saccharomyces Cerevisiae; Trealose; Membrane Protein; Molecular Biology; Trehalose
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: O gene AGT1 do locus mal1g, do sistema de transporte de maltose de S. cerevisiae, codifica uma proteína de 67 kDa, que tem 75% de similaridade e 58% de identidade com o transportador de maltose do locus MAL1. Sua expressão é ativada por genes reguladores constitutivos do sistema MAL, e é reprimida pela glicose. A cepa AP68-7A carrega o gene AGT1, e possivelmente o gene transportador MAL31, e transporta trealose ao final da primeira fase de crescimento anaeróbico. SDS-PAGE comparando proteínas de membranas de células reprimidas pela glicose (taxa de transporte <0,5 U/mg), com aquelas de células induzidas por α-metilglicosídeo (taxa de transporte de ~35 U/mg), verificou-se 2 bandas (PMs 57 e 66 kDa) exclusivas em membranas de células induzidas. As 2 bandas foram isoladas por três métodos diferentes (cromatografia de troca iônica, lavagens da membrana com tampão de alta força iônica e cromatografia de afinidade) e testadas para ligação de 14C-trealose. A ligação foi enriquecida ~3 X após a cromatografia de troca iônica. O transporte de trealose na cepa AP77-4C (que não tem nenhum dos genes transportadores dos loci MAL) foi recuperado após sua transformação com plasmídeo YEp366-AGT1. De membranas plasmáticas destas células (transporte de trealose ~25 U/mg) foram isoladas por cromatografia de afinidade, 2 bandas cujos PMs em SDS-PAGE são idênticos aos das proteínas isoladas das membranas da cepa AP68-7A. Estes resultados permitem concluir que o transportador de trealose de leveduras é codificado pelo gene AGT1.
  • DOI: 10.11606/D.46.1999.tde-02102014-124552
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química
  • Data de criação/publicação: 1999-04-12
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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