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Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal.

Fontolan, Laureana Stelmastchuk Benassi

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia 2016-01-18

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal.
  • Autor: Fontolan, Laureana Stelmastchuk Benassi
  • Orientador: Ferreira Júnior, José Ribamar dos Santos
  • Assuntos: Superóxido Dismutase; Especificidade Por Metal; Análise De Acoplamento Estatístico; Trypanosoma Brucei; Trichoderma Reesei; Metal Specificity; Statistical Coupling Analysis; Superoxide Dismutase
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Notas Locais: Programa Interunidades em Biotecnologia EP/FMVZ/ IPT/IB/ICB/I. BUTANTAN;Nome do Programa Interunidades no site do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
  • Descrição: Superóxido dismutases (SODs) são metaloenzimas que convertem o ânion superóxido em oxigênio molecular (O2) e peróxido de hidrogênio (H2O2). A presença de metal nessas enzimas está diretamente relacionada com seus mecanismos de catálise e com suas estruturas tridimensionais. Evolucionariamente, FeSOD e MnSOD podem ter evoluído de um gene ancestral comum, porque possuem sequências homólogas e estruturas cristalográficas sobreponíveis. Entretanto, a nível catalítico, ambas as proteínas divergiram o suficiente para que seus metais não possam ser intercambiáveis, produzindo uma enzima funcional, indicando que essas proteínas possuem alta especificidade por metal. O objetivo deste projeto de pesquisa é Identificar os determinantes estruturais do ajuste fino da especificidade por metal de MnSOD e FeSOD. Inicialmente, pretendese selecionar resíduos para mutagênese sítio-dirigida em TrMnSOD e TbFeSODB2, a partir de análise de acoplamento estatístico (SCA). Em seguida, mutantes serão construídos, expressos, purificados e cristalizados. A estrutura tridimensional dos mutantes será resolvida por cristalografia e sua atividade enzimática determinada, bem como a acomodação estrutural dos metais por Resonância Paramagnética Eletrônica. Nossa hipótese de trabalho é que através de SCA é possível elencar resíduos de aminoácidos candidatos para mutagênese sítio-dirigida para desenhar novas SODs, com características intermediárias de ligação por Fe/Mn, como possibilidade de interconversão de especificidade, caminhando na história evolutiva dessas moléculas.
  • DOI: 10.11606/D.87.2016.tde-25082016-105547
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia
  • Data de criação/publicação: 2016-01-18
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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