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Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada

Gabriel M. Santos Adriana Maria Calvo; Carlos Ferreira dos Santos; Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP (23. 2015 Bauru)

Resumos São Paulo: Universidade de São Paulo, 2015

São Paulo Universidade de São Paulo 2015

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  • Título:
    Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada
  • Autor: Gabriel M. Santos
  • Adriana Maria Calvo; Carlos Ferreira dos Santos; Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP (23. 2015 Bauru)
  • Assuntos: GENÓTIPOS; CITOCROMO P-450; DNA; SALIVA -- GENÉTICA; TÉCNICAS DE GENOTIPAGEM
  • É parte de: Resumos São Paulo: Universidade de São Paulo, 2015
  • Notas Locais: MPC Digital
  • Descrição: Objetivos: A coleta de saliva para a obtenção do DNA genômico de voluntários é uma boa estratégia para se assegurar a adesão, pois é um método não invasivo. Na saliva há células descamadas da cavidade bucal, as quais possuem material genético por conta da presença de DNA. O citocromo P450, possui papel fundamental na metabolização de anti-inflamatórios não esteroidais (AINES) e variações genéticas podem aumentar a incidência de efeitos colaterais. Os resultados obtidos na genotipagem desses voluntários fornecerão a base para um estudo mais abrangente de farmacogenética, área que estuda a associação dos fatores genéticos em relação às repostas individuais aos fármacos (processo FAPESP 2015/10198-8). Métodos: Para a extração de DNA a partir da saliva foi utilizado o QIAamp DNA Mini Kit. Os tubos contendo DNA ficaram armazenados a -20oC até o momento do uso. Para a discriminação dos diferentes genótipos dos genes em estudo, foi utilizado o sistema Taqman® no aparelho de PCR (reação em cadeia da polimerase) em tempo real Viia7. Para discriminação dos haplótipos do CYP2C9 (CYP2C9*2 – rs1799853 e CYP2C9*3 – rs1057910) e CYP2C8 (CYP2C8*3 rs11572080 e rs10509681) foram utilizados ensaios produzidos e validados pela empresa AppliedBiosystems®. Após a confecção dos ensaios em placa de 384 poços, esta foi colocada no aparelho Viia7 e as seguintes condições de ciclagem foram utilizadas para a realização da PCR: temperatura inicial de 95ºC por 10 minutos para a ativação da Taq polimerase, e em seguida 45 ciclos de 95ºC por 15 segundos e 60ºC por 1 minuto. Resultados: (tabela) Na amostra obtida dentre os 10 voluntários, dois apresentaram-se heterozigotos, sendo um CYP2C9 *1/*2 e outro CYP2C9 *1/*3, os outros 8 são homozigotos ancestrais para o CYP2C9 *1/*1. Para o CYP2C8 *3, todos os voluntários são homozigotos ancestrais.
    Conclusões: O DNA genômico extraído da saliva mostrou-se eficiente para a genotipagem do citocromo P450. E os resultados obtidos servirão de base para as análises farmacogenéticas desses indivíduos em relação ao AINE piroxicam.
  • Editor: São Paulo Universidade de São Paulo
  • Data de criação/publicação: 2015
  • Formato: 1 p.
  • Idioma: Português
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