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Elementos conjugativos integrativos da família SXT/R391 em isolados clínicos de Proteus mirabilis e a sua relação com resistência, mutagênese e conjugação.

Sato, Juliana Lumi

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Ciências Biomédicas 2021-11-04

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Elementos conjugativos integrativos da família SXT/R391 em isolados clínicos de Proteus mirabilis e a sua relação com resistência, mutagênese e conjugação.
  • Autor: Sato, Juliana Lumi
  • Orientador: Galhardo, Rodrigo da Silva
  • Assuntos: Resistência À Antimicrobianos; Conjugação; Mutagênese; Genética Bacteriana; Ices Sxt/R391; Mutagenesis; Conjugative Transfer; Bacterial Genetics; Antimicrobial Resistance
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Notas Locais: ICB - T.6033 – Observação - Tombo versão digital
  • Descrição: Proteus mirabilis é uma bactéria causadora de infecções urinárias associadas ao uso prolongado de cateteres, que frequentemente tem elementos conjugativos integrativos (ICEs) da família SXT/R391 inseridos em seu genoma. Estes ICEs podem carregar genes de resistência aos antimicrobianos em suas regiões variáveis e possuem genes conservados que regulam o próprio mecanismo de transferência, além de outros genes conservados de funções desconhecidas ou não essenciais para conjugação. Dentre os genes conservados se encontra o operon rumAB que codifica uma polimerase da família Y, que possui atividade translesão caracterizada pela elevada taxa de erro. A expressão desses genes dentro do ICE (tanto os do processo de conjugação como também o rumAB) está sob controle de elementos regulados pela resposta SOS. Essa resposta é induzida por danos no DNA, causados por diversos agentes genotóxicos como, por exemplo, exposição aos antibióticos ou luz ultravioleta. Por induzir as polimerases translesão, a resposta SOS leva ao aumento transiente da taxa de mutação, o que pode levar ao surgimento de resistência a certos antimicrobianos. No genoma de P. mirabilis, não há homólogos dos genes que codificam a principal polimerase translesão (Pol V), a não ser em linhagens que carregam o ICE SXT/R391 que tem consigo o rumAB. Sendo assim, neste projeto, além de realizar uma caracterização genômica destes elementos em isolados clínicos brasileiros, realizamos análises funcionais da polimerase translesão rumAB, nos processos de mutagênese e na conjugação do próprio ICE. Os genomas das linhagens portadoras do ICE SXT/R391 da nossa coleção de isolados clínicos foram sequenciados para analisar a estrutura dos ICEs, identificando possíveis genes de resistência e os demais fatores associados, além de realizar análises filogenéticas comparando com outros ICEs e linhagens do banco de dados. Além disso, o operon rumAB de cada linhagem foi clonado em um vetor de E. coli para avaliar o efeito na mutagênese em linhagens de E. coli desprovida de umuDC, e observamos que há complementação do efeito na mutagênese induzida. Quando avaliamos o efeito do mesmo ICE na mutagênese por UV em diferentes pares de linhagens isogênicas de P. mirabilis, observamos que o efeito é discrepante entre algumas linhagens, o que sugere que o background genético de cada linhagem tem influência na atividade mutagênica. Quanto ao papel do rumAB na conjugação, observamos que o operon parece ter influência no sucesso da conjugação principalmente quando há exposição à luz UV, o que reforça a ideia de que a conservação de genes de Pol V em elementos genéticos móveis têm papel considerável na disseminação destes além de conferir a capacidade de mutagênese via resposta SOS.
  • DOI: 10.11606/D.42.2021.tde-09022022-185051
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Ciências Biomédicas
  • Data de criação/publicação: 2021-11-04
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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