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Avaliação dos efeitos de diluidores e crioprotetores para o espermatozóide eqüino pelo uso de microscopia de epifluorescência, citometria de fluxo, análises computadorizadas da motilidade (CASA) e da morfometria (ASMA)

Rubens Paes de Arruda

2000

Localização: FMVZ - Fac. Med. Vet. e Zootecnia    (T.914 FMVZ )(Acessar)

  • Título:
    Avaliação dos efeitos de diluidores e crioprotetores para o espermatozóide eqüino pelo uso de microscopia de epifluorescência, citometria de fluxo, análises computadorizadas da motilidade (CASA) e da morfometria (ASMA)
  • Autor: Rubens Paes de Arruda
  • Assuntos: MEDICINA VETERINÁRIA; EQUINOS; CRIOPRESERVAÇÃO; CITOMETRIA DE FLUXO; MORFOMETRIA
  • Notas: Tese (Livre Docência)
  • Descrição: A determinação um meio ótimo para a criopreservação do espermatozoide eqüino tem sido meta de muitas pesquisas. No entanto, há consenso de que não existe um único teste "in vitro" que possa predizer com exatidão o potencial de fertilidade do sêmen de garanhões congelado. Este experimento foi delineado com os objetivos de avaliar os parâmetros da motilidade, viabilidade, integridade de acrossomo e morfometria da cabeça dos espermatozóides de eqüinos criopreservados em 6 diferentes meios (3 diluidores x 2 crioprotetores). O sêmen de 6 garanhões foram colhidos e congelados em palhetas de 0,5 mL a concentração de 200 x '10 POT. 6' espermatozóides/mL utilizando-se os seguintes diluidores: Al = EDTA-Lactose-gema de ovo (Modificado de MARTIN et al., 1979), com concentração final de glicerol de 5%; A2 = EDTA- lactose-gema de ovo, com concentração final de etilenoglicol de 5%; B1 = INRA82 (modificado de PALMER, 1984), com 5% de glicerol; B2 = INRA82, com 5% de etilenoglicol; C1= leite desnatado (Modificado de BURNS e FLEMING, 1988), com 5% de glicerol; C2 = leite desnatado, com 5% de etilenoglicol. Após a descongelação das palhetas ('37 GRAUS'C/30s), os parâmetros da motilidade foram avaliados pelo sistema computadorizado (CASA), a viabilidade espermática e a integridade dos acrossomos foram avaliadas por microscopia de epifluorescência e citometria de fluxo, utilizando-se o FITC-PSA/H258 e FITCPSA/PI, respectivamente. As morfometrias da cabeça dos espermatozóides
    (comprimento, largura, alongamento, área e perímetro) foram comparadas entre o sêmen congelado e o diluído a fresco pelo sistema computadorizado (ASMA). Foram observadas diferentes estatísticas significativas entre garanhões, diluidores e interação entre garanhão e diluidores após avaliação dos parâmetros da motilidade pelo CASA e a viabilidade espermática e integridade do acrossomo pela microscopia de epifluorescência e citometria de fluxo (P>0,05). Também ) foram encontradas diferenças estatísticas na congelabilidade do sêmen de garanhões com o uso do glicerol ou etilenoglicol como crioprotetores (P<0,05). Foram observados efeitos de garanhões, diluidores, bem como a interação entre garanhão e diluidores sobre as morfometrias dos espermatozóides criopreservados quando comparados com o sêmen à fresco (P<0,05). Não houve diferentes nas morfometrias da cabeça dos espermatozóides quando foram congelados em glicerol ou etilenoglicol (P<0,05). Baseado nos resultados, pode-se sugerir a realização de baterias de testes utilizando-se diferentes diluidores preparados com diferentes crioprotetores para cada garanhão, antes que um programa de congelação do sêmen seja estabelecido. Como houve redução das morfometrias da cabeça dos espermatozóides dos garanhões após a criopreservação, porém sem a causa exata de tais modificações, futuras investigações devem ser realizadas
  • Data de criação/publicação: 2000
  • Formato: 121 p.
  • Idioma: Português
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