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Caracterização do gene LEAFY de Saccharum ssp e análise filogenética entre diferentes espécies vegetais utilizando as sequências da família LEAFY/FLORICAULA

Luciana Harumi Morimoto Figueiredo Maria Helena de Souza Goldman

2003

Localização: FFCLRP - Fac. Fil. Ciên. Let. de R. Preto    (Figueiredo, Luciana H. M )(Acessar)

  • Título:
    Caracterização do gene LEAFY de Saccharum ssp e análise filogenética entre diferentes espécies vegetais utilizando as sequências da família LEAFY/FLORICAULA
  • Autor: Luciana Harumi Morimoto Figueiredo
  • Maria Helena de Souza Goldman
  • Assuntos: BIOLOGIA VEGETAL; FILOGENIA
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: Entender o processo do florescimento é um conceito fundamental na biologia do desenvolvimento e em estudos filogenéticos, além de possuir também interesse prático na floricultura e agricultura. A formação da flor depende da transição do meristema vegetativo para um meristema inflorescência e posteriormente para um meristema floral. Esta transição requer a ação de vários genes, onde um dos principais descritos é o gene LEAFY, que é expresso muito cedo nesse processo. Para estudar o processo de florescimento em cana-de-açúcar, o banco de dados do SUCEST foi analisado e foi encontrado um EST com similaridade significativa à seqüência LEAFY de Arabidopsis. O cDNA correspondente foi completamente seqüenciado em nosso laboratório. Ele contém 1531pb e codifica uma seqüência de aminoácidos com duas regiões altamente, conservadas na família de fatores de transcrição LEAFY/FLORICAULA. Para realizar uma caracterização funcional do putativo gene LEAFY de cana-de-açúcar, foram construídos vetores de expressão em planta contendo o cDNA de cana-de-açúcar na orientação antisense sob controle de promotores constitutivos. Para a transformação de cana-de-açúcar foi utilizado o vetor pAHC17 que contém o promotor da Ubiquitina de milho e um "enhancer", como base para nossa construção final. Para a transformação e plantas de fumo foi utilizado um vetor derivado do pDE1001, no qual o cDNA LEAFY deve ser expresso sob o controle do promotor 35S. Em ambos os casos o marcador de seleção foi o
    gene NPTII que confere resistência ao antibiótico kanamicina em células transformadas. Calos da variedade SP87-432 de cana-de-açúcar foram transformados por biobalística e discos foliares de plantas do fumo foram transformados via Agrobacterium. Os resultados mostraram 10 plantas de cana-de-açúcar resistentes à kanamicina que foram transferidas para um telado na COPERSUCAR, das quais 2 confirmaram a presença do cDNA LEAFY e estão esperando a ) liberação pela CTNBio para serem liberadas ao plantio experimental no campo. Análises com plantas transgênicas de Nicotiana tabacum mostraram 9 plantas de fumo resistentes à kanamicina que foram posteriormente transferidas para casa de vegetação. Um outro objetivo deste trabalho foi estabelecer uma relação filo genética entre as diferentes espécies de Angiospermas. Foram obtidos cladogramas baseados nas seqüências de nucleotídeos e aminoácidos dos homólogos ao gene LEAFY de Arabidopsis. Como grupo externo, seqüências de Gimnospermas e Pteridófitas foram utilizadas. A análise do cladograma corroborou a hipótese que monocotiledôneas compõem um clado monofilético e que famílias usualmente reunidas nas eudicotiledôneas não formam uma unidade monofilética. Além disso, a análise coloca Nymphaea como grupo irmão das remanescentes Angiospermas amostradas, o que corrobora com recentes reconstruções filogenéticas. Saccharum aparece mais próxima de Lolium e Oryza do que de Juncus, dentro das monocotiledôneas
  • Data de criação/publicação: 2003
  • Formato: 137 p. anexos.
  • Idioma: Português
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