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Criopreservação de células-tronco murina para estudos da resposta imune inata de macrófagos
Fernanda Martins Marim Dario Simões Zamboni
2011
Localização:
FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto
(Marim, Fernanda Martins )
(Acessar)
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Título:
Criopreservação de células-tronco murina para estudos da resposta imune inata de macrófagos
Autor:
Fernanda Martins Marim
Dario Simões Zamboni
Assuntos:
MACRÓFAGOS
;
CÉLULAS DA MEDULA ÓSSEA
;
CRIOPRESERVAÇÃO
;
LEGIONELLA PNEUMOPHILA
;
LEISHMANIA
Notas:
Dissertação (Mestrado)
Descrição:
O macrófago é uma importante célula do sistema imune inato e adaptativo que exerce papel fundamental em diferentes processos imunológicos como processamento e apresentação de antígenos, produção de citocinas, killing microbiano entre outros. Conseqüentemente, o macrófago murino se tornou um importante modelo de célula hospedeira em diversos estudos das funções exercidas por esta célula. Assim sendo, faz-se necessária a obtenção e cultivo de populações homogêneas de macrófagos que possam ser utilizadas em estudos in vitro relacionados à resposta imune, sobretudo aquelas derivadas de camundongos geneticamente modificados em que genes criticas associados à resposta imune sofreram perda ou ganho-de-função. Hoje, avanços importantes nessa frente têm sido possíveis através da obtenção e cultivo de macrófagos derivados da medula óssea (BMDM, do inglês bone marrow derived macrophage) desses organismos. Nos últimos anos, foi extensivamente investigado métodos de congelamento e armazenamento de células hematopoiéticas humanas, entretanto, não há muitas informações sobre a geração de macrófagos derivados da medula óssea (BMDM) obtidas a partir de células da medula óssea de camundongos congelada. Neste estudo, nosso objetivo foi estabelecer um protocolo de congelamento de células da medula óssea murina para posterior diferenciação a macrófagos e estudos in vitro de suas funções. Foi visto que células da medula óssea congelada há mais de 6 anos mantêm sua capacidade de diferenciação em macrófagos. Além disso, nós comparamos BMDM de precursores frescos ou congelados e observamos que as duas populações foram capazes de induzir similarmente a expressão de moléculas co-estimulatórias CD80 e CD86 em resposta ao lipopolissacarideo (LPS) e à infecção com a bactéria intracelular Legionella pneumophila. Adicionalmente, BMDM murina obtidas da medula fresca ou congelada foram capazes de
restringir igualmente a multiplicação de L. pneumophila e favorecer a replicação do protozoário Leishmania (L.) amazonensis. Foi visto também que é possível obter células dendríticas através de células da medula óssea criopreservadas e, embora sejam experimentas preliminares, células dendríticas derivadas da medula óssea (BMDC) murina obtidas da medula fresca e previamente congelada responderam de maneira similar quando estimuladas com LPS. Com isso, este método descrito e validado representa um avanço técnico uma vez que permite a diferenciação de macrófagos a partir de células da medula óssea criopreservadas
Data de criação/publicação:
2011
Formato:
77 p anexos.
Idioma:
Português
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