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Caracterização estrutural e funcional da insularina, uma nova disintegrina do veneno de Bothrops insularis

Maisa Splendore Della Casa Ana Maria Moura-da-Silva

2004

Localização: ICB - Inst. Ciências Biomédicas    (T-ICB BMI QW504 D357c 2004 )(Acessar)

  • Título:
    Caracterização estrutural e funcional da insularina, uma nova disintegrina do veneno de Bothrops insularis
  • Autor: Maisa Splendore Della Casa
  • Ana Maria Moura-da-Silva
  • Assuntos: IMUNOLOGIA; PROTEÍNAS; WESTERN BLOTTING -- EXPERIMENTAÇÃO E EXPERIMENTOS -- MÉTODOS -- TÉCNICAS; CÉLULAS ENDOTELIAIS; VENENOS DE ORIGEM ANIMAL
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: A fim de identificarmos novas disintegrinas em venenos de serpentes, fracionamos o veneno de B. insularis em coluna C18, fase reversa, em HPLC. Assim, identificamos na fração 3, a insularina. Essa fração inibiu 100% da agregação plaquetária induzida por ADP. Quando a fração 3 foi submetida à SDS-PAGE, revelou uma única banda que, por Western Blotting, apresentou reatividade com anticorpos anti-disintegrinas. O sequenciamento N-terminal e análise por MALDI-TOF comprovaram sua identidade disintegrina. A insularina foi então caracterizada na forma recombinante (GST-INS) a partir da clonagem de seu cDNA, clone GH063pro, isolado da biblioteca de cDNA da glândula de veneno de B. insularis. O cDNA da insularina foi clonado em vetor pGEX-4T-1. A GST-INS apresentou capacidade de inibiu a agregação plaquetária e a ligação de células endoteliais tEND à vitronectina. Diferentemente, a GST, não apresentou atividade frente às plaquetas ou frente às células tEND. O presente trabalho apresentou a caracterização da insularina na forma nativa e recombinante.
  • Data de criação/publicação: 2004
  • Formato: 150 p.
  • Idioma: Português
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