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Avaliação de modelos in vitro para o estudo da inativação do cromossomo X em humanos

Orsi, Ana Elisa Ribeiro

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Biociências 2023-08-21

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Avaliação de modelos in vitro para o estudo da inativação do cromossomo X em humanos
  • Autor: Orsi, Ana Elisa Ribeiro
  • Orientador: Carramaschi, Lygia da Veiga Pereira
  • Assuntos: Blastoides; Células Tronco Pluripotentes; Inativação Do Cromossomo X; Blastoids; Pluripotent Stem Cells; X Chromosome Inactivation
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: A inativação do cromossomo X (ICX) é um processo de compensação de dose que ocorre nas células fêmeas de mamíferos placentários. A ICX em humanos inicia-se por volta do estágio de blastocisto, e seu entendimento é prejudicado pelas dificuldades associadas ao uso de embriões em pesquisa. Para lidar com esse problema, nós avaliamos diferentes modelos para o estudo da ICX in vitro. Células no estado primed exibiram expressão monoalélica do gene MECP2, ligado ao cromossomo X, e uma única nuvem de XIST. Após conversão para o estado naive, expressão bialélica do gene MECP2 foi observada, assim como a ausência de nuvens de XIST durante as primeiras duas passagens. Avaliação de EPSCs in vitro e in silico sugeriram que essas células já passaram pelo processo de ICX. Resultados similares foram observados para células cultivadas no meio 4CL. Depois de nova conversão para o estado primed, células naive cultivadas em 5iLA passaram pela inativação do mesmo alelo do gene MECP2 previamente inativo. Por outro lado, blastoides gerados a partir de células cultivadas no meio PXGL demonstraram ICX progressiva e aleatória, apesar de viés para re-inativação do alelo de MECP2 previamente inativo ter sido observado. Esses resultados sugerem que blastoides humanos podem ser usados para o estudo da ICX humana in vitro.
  • DOI: 10.11606/D.41.2023.tde-23102023-180216
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Biociências
  • Data de criação/publicação: 2023-08-21
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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  • Realização: ABCD-USP USP   Logos de Redes Sociais: Freepik

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