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Determinação dos parâmetros quantitativos da birrefringência da zona pelúcida e da ultraestrutura de oócitos maturados in vitro frescos e criopreservados, e sua correlação com qualidade oocitária utilizando modelo experimental bovino

Luciene Aparecida Batista Ana Carolina Japúr de Sá Rosa e Silva

2014

Localização: FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto    (Batista, Luciene Aparecida )(Acessar)

  • Título:
    Determinação dos parâmetros quantitativos da birrefringência da zona pelúcida e da ultraestrutura de oócitos maturados in vitro frescos e criopreservados, e sua correlação com qualidade oocitária utilizando modelo experimental bovino
  • Autor: Luciene Aparecida Batista
  • Ana Carolina Japúr de Sá Rosa e Silva
  • Assuntos: OÓCITOS; BOVINOS; EMBRIÃO (DESENVOLVIMENTO)
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: O desenvolvimento de técnicas não invasivas capazes de selecionar oócitos com bom potencial reprodutivo, sejam frescos ou criopreservados, tem sido alvo de inúmeros estudos. A microscopia polarização (MP) é uma técnica não invasiva que garante a rápida visualização das estruturas birrefringentes oocitárias. No caso da zona pelúcida, uma estrutura oocitária altamente sensível a criopreservação, esta técnica determina escores de birrefringência que tem sido associados à qualidade oocitária, a investigação do estágio meiótico e ao potencial de desenvolvimento embrionário, podendo também eventualmente servir como ferramenta na avaliação do impacto do processo de criopreservação sobre o oócito. Este trabalho visou determinar os parâmetros quantitativos de birrefringência da zona pelúcida de oócitos bovinos frescos e criopreservados e correlacioná-los com o desenvolvimento embrionário e com a ultraestrutura oocitária analisada por microscopia eletrônica de varredura e transmissão. Quinhentos e noventa e cinco oócitos foram matutados in vitro, selecionados quanto a visualização do corpúsculo polar e avaliados por MP. Em seguida esses oócitos foram ativados partenogeneticamente, cultivados in vitro e o desenvolvimento embrionário foi avaliado nos dias 3,6,7,8 e 9. Em um segundo experimento, 50 oócitos foram analisados quanto à sua birrefringência antes e após a vitrificaçao/desvitrificação e separados em grupos de baixa, média e alta birrefringência. Os oócitos foram então fixados para microscopia eletrônica de transmissão e varredura para análise ultraestrutural. Os sistemas de cultivo individual WOW (N=188) e em microgotas (N=l 18) apresentaram resultados estatisticamente semelhantes, porém o cultivo em sistema WOW, foi considerado clinicamente mais relevante devido a maiores taxas de formação de blastocisto e eclosão, sendo, portanto adotado nos
    experimentos seguintes. Na análise da birrefringência de oócitos matutado in vitro e o seu potencial de desenvolvimento embrionário não foi observado nenhuma correlação entre os valores de birrefringência do oócito e os resultados reprodutivos, tais como as taxas de clivagem, a formação de blastocisto e de eclosão, uma vez que os dados foram semelhantes entre os oócitos de baixa e alta birrefringência. As análises qualitativas por microscopia eletrônica de varredura e transmissão revelou diferentes padrões de ultraestrutura em oócitos frescos e criopreservados de baixa, média e alta birrefringência (p<0,001). A birrefringência da zona pelúcida analisada por microscopia de luz polarizada parece não ser um bom marcador de competência pro desenvolvimento embrionário, mas tem correlação com a ultraestrutura de oócitos frescos e criopreservados, confirmado por microscopia eletrônica de varredura e transmissão
  • Data de criação/publicação: 2014
  • Formato: 78 p anexos.
  • Idioma: Português
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