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Bloqueio da meiose e óxido nítrico na maturação in vitro de oócitos bovinos
Cláudia Lima Verde Leal
2007
Localização:
FZEA - Fac. Zoot. Eng. de Alimentos
(T.784 2007 e.2 )
(Acessar)
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Título:
Bloqueio da meiose e óxido nítrico na maturação in vitro de oócitos bovinos
Autor:
Cláudia Lima Verde Leal
Assuntos:
MEIOSE
;
EMBRIÃO DE ANIMAL
;
ÓXIDO NÍTRICO
;
APOPTOSE
;
EXPRESSÃO GÊNICA
Notas:
Tese (Livre Docência)
Descrição:
Apesar dos grandes avanços na produção in vitro (PIV) de embriões bovinos, a produção de blastocistos se mantém ainda aquém do observado in vivo, indicando que melhorias ainda são necessárias no processo de PIV. A menor competência para o desenvolvimento de oócitos utilizados na PIV tem sido relacionada, ente outros fatores, ao encurtamento do período de capacitação. Foi sugerido que o bloqueio meiótico poderia permitir ao oócito um tempo adicional para adquirir a competência. O bloqueio meiótico pode ser induzido por inibidores de cinases dependentes de ciclinas (CDK) que inibem especificamente o fator promotor da maturação (MPF). O presente trabalho teve por objetivo determinar as melhores condições de indução de bloqueio meiótico e averiguar os efeitos do procedimento sobre uma série de parâmetros relativos à maturação nuclear e citoplasmática. No primeiro estudo (Estudo 1) foram comparados diferentes inibidores de CDK (CDKI) quanto à sua capacidade de indução de bloqueio meiótico reversível. A butirolactona I (BLI) mostrou-se mais eficaz e foi selecionada para os experimentos posteriores. No estudo seguinte (Estudo 2) avaliou-se o efeito de diferentes condições de cultivo com a BLI sobre diferentes parâmetros que incluíram a cinética da maturação nuclear, organização do citoesqueleto (microtúbulos e microfilamentos), distribuição de organelas (grânulos corticais e mitocôndrias) e desenvolvimento embrionário. Observou-se que a cinética da
maturação é acelerada independentemente das condições de cultivo e que a BLI não causa alterações no citoesqueleto, inibe reversivelmente a migração de organelas, sendo apenas parcial sobre mitocôndrias e não prejudica o desenvolvimento embrionário. Além disso, a BLI pode ser utilizada com segurança em baixa concentração de BLI (10 µM) em meio de cultivo sem macromoléculas para indução de bloqueio meiótico. No último estudo (Estudo 3), avaliaram se as conseqüências do ) bloqueio meiótico sobre a expressão dos componentes do MPF (p34 cdc2 e ciclina B1) e da proteína cinase ativada por mitógenos (MAPK), que controlam a progressão da meiose. O bloqueio meiótico não provocou alterações na expressão de MPF e MAPK e teve pouco efeito sobre suas atividades. Conclui-se que embora o procedimento não tenha melhorado a competência para o desenvolvimento, também não provocou alterações importantes nos oócitos. Sendo assim, o bloqueio meiótico pode ser utilizado como ferramenta para estudos sobre o desenvolvimento do oócito e do controle da meiose
Data de criação/publicação:
2007
Formato:
186 p. il.
Idioma:
Português
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