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Regulação da expressão gênica pelo pH em fungos filamentosos caracterização molecular do gene pacC

Sérgio Ricardo Nozawa Antônio Rossi

2002

Localização: FFCLRP - Fac. Fil. Ciên. Let. de R. Preto    (Nozawa, Srgio Ricardo )(Acessar)

  • Título:
    Regulação da expressão gênica pelo pH em fungos filamentosos caracterização molecular do gene pacC
  • Autor: Sérgio Ricardo Nozawa
  • Antônio Rossi
  • Assuntos: FUNGOS; EXPRESSÃO GÊNICA
  • Notas: Tese (Doutorado)
  • Descrição: Os fungos filamentosos Aspergillus nidulans e Neurospora crassa são organismos nutricionalmente versáteis e podem crescer em várias condições, incluindo variações extremas de pH. Essa versatilidade implica na regulação do pH homeostático, onde essas variações não são amplas, e no monitoramento do pH extracelular, para que sejam sintetizadas permeases e secretadas enzimas que efetivamente funcionem no meio externo, como por exemplo, a secreção de fosfatase ácida em meio ácido e fosfatase alcalina em meio alcalino. Além disso, o fungo A. nidulans está entre os organismos cujo sistema de monitoramento e resposta ao pH extracelular está melhor caracterizado. Nesse fungo é conhecida a existência de genes alcalinos (expressados em pH alcalino e cuja transcrição não seria ativada em pH ácido) e de genes ácidos (expressados em pH ácido, e cuja transcrição não seria ativada em pH alcalino). O controle desse sistema "liga/desliga" dos genes ácidos e alcalinos seria efetuado diretamente pelo produto do gene pacC (fator de transcrição), via sinalização dos genes pai (A, B, C, F, H e I). Entretanto, em N. crassa, o sistema de regulação gênica pelo pH é menos conhecido, mas todos os resultados obtidos até o momento sugerem a existência de um controle para a secreção seletiva de enzimas em função do pH do meio. Neste trabalho, nós identificamos e caracterizamos em N. crassa um homólogo do gene pacC de A. nidulans (pacC-1). Os fragmentos de DNA da biblioteca genômica
    contendo o gene pacC-1 complementam a mutação pacC14 de A. nidulans e restauram a secreção de fosfatase ácida Pi-repressível e suas propriedades estruturais, além da recuperação da atividade e da migração da fosfatase alcalina Pi-repressível. Os nossos resultados também mostram que o gene pacC-1 está envolvido na regulação de modificações pós-traducionais das fosfatases secretadas por esse fungo (glicosilações), necessárias para a secreção de uma enzima ) adaptada para as condições do meio extracelular, em adição à possível participação do gene pacC-1 na regulação da transcrição dos genes estruturais dessas enzimas. Além disso, o mapeamento do gene pacC-1 por RFLP sugere a sua localização no cromossomo I, e a linhagem pacC-1-, proveniente da inativação por RIP, mostrou o envolvimento deste gene na diferenciação celular do fungo assim como os seus homólogos em Saccharomyces cerevisae e Candida albicans. O gene pacC-1 também pode estar envolvido na expressão da proteína "heat shock" codificada pelo gene hsp70. Esta proteína "chaperone" facilita a formação da conformação nativa de proteínas transportadas através do retículo endoplasmático, com concomitante glicosilações específicas dessas proteínas destinadas para a secreção, como por exemplo as fosfatases Pi-repressíveis. Nossos resultados indicam que a proteína PacC de N. crassa está glicosilada e sofre hidrólise em pH alcalino, o que representa um passo a mais na direção de desvendarmos os mecanismos
    moleculares que atuam na sinalização do pH extracelular em fungos filamentosos
  • Data de criação/publicação: 2002
  • Formato: 167 p.
  • Idioma: Português
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