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Potencial regenerativo das células-tronco retinianas do corpo ciliar e expressão de MicroRNAs da família LET-7

Carolina Beltrame Del Debbio Priscilla Sayami Akamine; Edna Teruko Kimura; Dânia Emi Hamassaki; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE) (29. 2014 Caxambu); Congresso Brasileiro de Biofísica (SBBf) (39. 2014 Caxambu); Congresso Brasileiro de Investigação Clínica (SBIC) (30. 2014 Caxambu); Congress Brazilian Research Association in Vision and Ophthalmology (BRAVO) (11. 2014 Caxambu); Congresso da Sociedade Brasileira de Biociências Nucleares (SBBN) (9. 2014 Caxambu)

Resumos Minas Gerais: FeSBE, 2014

Caxambu FeSBE 2014

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  • Título:
    Potencial regenerativo das células-tronco retinianas do corpo ciliar e expressão de MicroRNAs da família LET-7
  • Autor: Carolina Beltrame Del Debbio
  • Priscilla Sayami Akamine; Edna Teruko Kimura; Dânia Emi Hamassaki; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE) (29. 2014 Caxambu); Congresso Brasileiro de Biofísica (SBBf) (39. 2014 Caxambu); Congresso Brasileiro de Investigação Clínica (SBIC) (30. 2014 Caxambu); Congress Brazilian Research Association in Vision and Ophthalmology (BRAVO) (11. 2014 Caxambu); Congresso da Sociedade Brasileira de Biociências Nucleares (SBBN) (9. 2014 Caxambu)
  • Assuntos: BIOLOGIA CELULAR E DO DESENVOLVIMENTO; RATOS; CÉLULAS EPITELIAIS; RETINA; CÉLULAS-TRONCO; REGENERAÇÃO (FENÔMENOS BIOLÓGICOS)
  • É parte de: Resumos Minas Gerais: FeSBE, 2014
  • Descrição: Introdução: O Corpo Ciliar (CC) é uma bi-camada de células epiteliais adjacentes à retina, composta por células pigmentadas (EP) e não-pigmentadas (ENP). Este tecido, especialmente o pigmentado, contém células-tronco retinianas quiescentes e é considerado uma fonte celular potencial para a terapia regenerativa retiniana. Apesar disso, pouco se sabe sobre sua pluripotencialidade e possíveis reguladores biológicos que poderiam interferir com a capacidade regenerativa, tais como os microRNAs (miRNAs). miRNAs são pequenos RNAs não-codificantes que regulam expressão gênica e influenciam uma ampla gama de processos fisiológicos e patológicos. Objetivos: O objetivo deste trabalho foi investigar a expressão dos marcadores progenitores retinianos e de pluripotência nas células dos epitélios pigmentado e não pigmentado do CC, assim como dos miRNAs da família Let-7em ratos adultos e neonatos. Metodos: Projeto aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal, CEEA protocolo no. 095/131/02. Ratos Wistar adultos (30-45 dias, pool de 5 animais/N, N=3) e neonatos (1-2 dias, pool de 10 animais/N, N=3) foram sacrificados e seus olhos enucleados. O CC foi manualmente dissecado da esclera e novamente dissecado entre EP e ENP. A expressão dos miRNAs da família Let-7 (-7a, -7b, -7c, 7d, -7e, -7f, -7g, -7i), dos genes de pluripotência Sox2, Nanog, Klf4 e Oct-4, e dos genes progenitores retinianos Pax6 e Chx10 foi investigada após extração do RNA total com o kit Qiagen e analisada por PCR em tempo real (7300 Systems Applied Biosystems) através do uso de cDNA obtido por transcrição reversa direcionada e específica. Análise estatística realizada através do Student t-test entre os tratamentos e respectivos controles
    Resultados: Os genes progenitores foram diferencialmente expressos no CC de neonatos (Pax6: ENP=22,4±2,6% e EP=14,76±0,25%; Chx10: ENP= 0,0053+0,08% e EP= 1,54±0,4%), mas muito similares no CC de adultos (Pax6: ENP=13,45±1,15% e EP= 11,3±0.08%; Chx10: ENP=0,0048±0,02% e EP= 0,0052±0.05%). Similarmente, os genes pluripotentes Nanog, Oct4 e Sox2 não apresentaram diferenças de expressão gênica entre o EP e ENP em adultos, além da diminuição de cerca de 70% quando comparados com neonatos. Nestes, Nanog, Oct4 e Sox2 foram mais expressos no ENP em comparação ao EP (1, 3 e 15 vezes mais, respectivamente), enquanto Klf4 foi mais expresso no EP de neonatos e adultos do que no ENP (0,25 e 0,90 vezes mais expressos), apresentando, também, menor expressão em adultos que neonatos. Todos os miRNAs Let-7 investigados foram expressos no CC de animais adultos, apresentando maiores níveis de expressão no CC do que na retina (de 0,5 a 4 vezes em média mais expressos). A comparação entre EP e ENP indicou maior expressão relativa dos miRNA no ENP (média de 2,5 vezes mais expressos). Conclusão: As células do CC de mamíferos adultos expressam genes progenitores retinianos e de pluripotência, apesar de apresentarem níveis menores do que em neonatos. Mesmo na presença destes genes, a capacidade regenerativa retiniana não é ativada. Nossos dados indicam que os miRNAs da família Let-7 são altamente expressos no CC de animais adultos, sugerindo que estes possam ser importantes reguladores negativos desta capacidade regenerativa da retina de mamíferos
  • Editor: Caxambu FeSBE
  • Data de criação/publicação: 2014
  • Formato: res. 25.005.
  • Idioma: Português
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