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Desenvolvimento de um cell factory a partir do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris

Awana Silva Lima Fernando Segato

Anais do1º Dia com Biotecnologia - Resumos Lorena-SP p.1, 2019

Lorena-SP EEL/USP 2019

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  • Título:
    Desenvolvimento de um cell factory a partir do fungo termofílico Thermothielavioides terrestris
  • Autor: Awana Silva Lima
  • Fernando Segato
  • Assuntos: BIOTECNOLOGIA; GENÉTICA; Cell Factory; Thermothielavioides Terrestris; Manipulação Genética
  • É parte de: Anais do1º Dia com Biotecnologia - Resumos Lorena-SP p.1, 2019
  • Notas: Disponível em: https://sites.usp.br/lot/dia-com-biotecnologia-resumos-2019/. Acesso em: 31 jan. 2024
  • Descrição: O desenvolvimento e o fortalecimento de uma economia de base biológica dependem da geração de novas tecnologias que sejam capazes de utilizar fontes renováveis para obtenção de produtos como biocombustíveis e compostos de valor agregado. O bagaço de cana-de-açúcar corresponde à biomassa lignocelulósica mais abundante nas biorrefinarias brasileiras, e as características estruturais da parede celular vegetal deste composto representam uma das maiores dificuldades em seu processamento industrial. Este fator gera uma grande necessidade no desenvolvimento de ferramentas mais eficazes na degradação enzimática dos polímeros presentes na parede celular. Neste cenário, o fungo termofílico Thermothielavioides terrestris pode ser considerado um candidato ideal para tornar-se uma cell factory, devido à alta capacidade degradadora de compostos lignocelulósicos demonstrada por este microrganismo. Portanto, este trabalho envolve a manipulação genética do fungo T. terrestris a fim de se obter um organismo chassi para a construção de uma cell factory para a produção de enzimas capazes de degradar de maneira mais eficiente a biomassa lignocelulósica de biorrefinarias, a fim de atingir rendimentos mais elevados de blocos construtores que serão utilizados para produção de biocombustíveis e compostos de alto valor agregado a partir deste resíduo. Ferramentas de biologia molecular como PCR e clonagem molecular usando o método de Gibson Assembly foram empregadas para montagem de cassetes utilizados na deleção dos genes ku70 e pyrG e para inserção do gene que codifica a enzima endonuclease Cas9 no genoma de T. terrestris. Os cassetes obtidos são constituídos pelo vetor binário pPZP201-BK e as regiões flanqueadoras dos genes alvos na região T do vetor.
    Essas construções foram inseridas em cepa de Agrobacterium tumefaciens EHA105 por choque térmico. A. tumefaciens será utilizado, posteriormente, para mediação da transformação genética de T. terrestris. Futuras modificações serão realizadas por meio da técnica de CRISPR-Cas9.
  • Editor: Lorena-SP EEL/USP
  • Data de criação/publicação: 2019
  • Formato: p.1.
  • Idioma: Português
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