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Produção de anticorpos anti-placenta de camundongas pela técnica "PHAGE DISPLAY" e seleção por panning sobre tecido desparafinizado

Luiz Augusto Vieira Cordeiro Cordeiro Estela Maris Andrade Forell Bevilacqua; M Kadirov; P Kaufmann; H Frank; Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV (2. 2003 São Paulo)

Resumos São Paulo: Comissão de Pesquisa do ICB/USP

São Paulo Comissão de Pesquisa do ICB/USP 2003

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  • Título:
    Produção de anticorpos anti-placenta de camundongas pela técnica "PHAGE DISPLAY" e seleção por panning sobre tecido desparafinizado
  • Autor: Luiz Augusto Vieira Cordeiro Cordeiro
  • Estela Maris Andrade Forell Bevilacqua; M Kadirov; P Kaufmann; H Frank; Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV (2. 2003 São Paulo)
  • Assuntos: HISTOLOGIA
  • É parte de: Resumos São Paulo: Comissão de Pesquisa do ICB/USP
  • Notas Locais: Disponível em CD-ROM
  • Descrição: A obtenção de anticorpos monoclonais por imunização de camundongos, seguida da seleção dos anticorpos antigeno-específicos pela técnica de construção de hibridomas pode apresentar limitada resposta imune com moléculas evolutivamente conservadas ou com material proveniente de mesma espécie. O uso de galinhas, espécie filogenetivamente muito distante dos roedores, como animal de escolha para a produção de anticorpos e o advento da técnica PHAGE DISPLAY para a produção de bibliotecas gênicas pela inserção de genes de escolha no genoma do bacteriófago filamentoso, é possível construir e selecionar anticorpos monoclonais sem o uso das técnicas convencionais. Neste estudo, galinhas White Leghorn foram imunizadas com macerado de placenta de camundongas para a construção de livrarias de fragmentos antigeno específicos (Fab) pela técnica de PHAGE DISPLAY. A seleção dos fagos foi feita por "panning" em, inicialmente, 8 "rounds" em reação tipo ELISA com extrato de cone ectoplacentário de 7,5 dias de gestação (ddg) em camundogas, seguida do uso de cortes desparafinizados de sítios de implantação (7,5 ddg) e de 13,5 dias de gestação. Após 4 blocos de "panning", Fabs específicos para trofoblastos de camundongos foram secionados por reação antigeno-específica seguindo protocolo similar aquele desenvovido para a técnica de imunohistoquímica. Os fagos reagiram especificamente com células gigantes, em ambas idades de gestação, assim como cone ectoplacentário.
    Deste modo, o panning "imunohistoquímico", associado com a técnica de PHAGE DISPLAY, é uma nova anternativa para a identificação de epítopos de interesse como é o caso dos marcadores presentes na placenta de camundogas. A especificidade dos fagos à estes epítopos desparafinizados mostra, por mais uma vez, a versatilidade desta técnica
  • Editor: São Paulo Comissão de Pesquisa do ICB/USP
  • Data de criação/publicação: 2003
  • Formato: Poster 22.
  • Idioma: Português
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