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Expressão dos genes TSPX e SRY em embriões bovinos pré-implantação
Paulo Lumy Takeuchi Ester Silveira Ramos
2008
Localização:
FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto
(Takeuchi, Paulla Lymy )
(Acessar)
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Título:
Expressão dos genes TSPX e SRY em embriões bovinos pré-implantação
Autor:
Paulo Lumy Takeuchi
Ester Silveira Ramos
Assuntos:
EMBRIÃO DE ANIMAL (IMPLANTAÇÃO)
;
BOVINOS
;
EXPRESSÃO GÊNICA
Notas:
Tese (Doutorado)
Descrição:
Introdução: TSPX e SRY são genes específicos dos cromos- somos X e Y, respectivamente, que estão envolvidos nos processos de transcrição, regulação do ciclo celular e podem estar relacionados à diferença na velocidade de desenvolvimento entre embriões machos e fêmeas de mamíferos no período pré-implantacional. Objetivos: Verificar a expressão dos genes TSPX e SRY em embriões bovinos pré-implantação produzidos por fertilização in vitro e comparar a expressão de TSPX entre embriões masculinos e femininos por PCR em tempo real. Material e Métodos: Como amostra controle foi utilizado tecido testicular bovino. Foram analisado pools de 20 embriões produzidos por fertilização in vitro para cada fase do desenvolvimento embrionário pré-implantação (1-2; 2-4; 4-8; 8-16; 16-32 células, mórula e blastocisto) para a análise qualitativa de expressão dos genes TSPX e SRY por RT-PCR.A seqüência obtida após a amplificação para o gene TSPX foi seqüenciada para confirmação da origem do segmento estudado. Para a análise quantitativa por PCR em tempo real foram obtidos seis embriões individualizados submetidos à extração concomitante de DNA (para a sexagem utilizando o gene TSPY) e RNA. O gene da ß-actina serviu como controle. Resultados: Foram encontrados transcritos dos genes TSPX e SRY no tecido testicular e em todas as fases analisadas do desenvolvimento embrionário bovino, exceto no estágio de 1-2 células. Com o DNA extraído foi possível realizar a sexagem dos
embriões antes da análise quantitativa, a qual revelou a presença de transcritos de TSPX apenas nos blastocistos femininos e no tecido testicular. Conclusão: A expressão dos genes estudados mostrou-se muito precoce, sendo verificada em todos os estágios, exceto no de 1-2 células. Foi detectado um padrão de expressão diferencial de TSPX entre machos e fêmeas no estágio de blastocisto que, associado à expressão de SRY nos embriões masculinos, poderia contribuir, para a diferença na velocidade de desenvolvimento entre os embriões machos e fêmeas relatada por vários autores nesse período do desenvolvimento embrionário
Data de criação/publicação:
2008
Formato:
74 p. anexos.
Idioma:
Português
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