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Avaliação morfológica e bioquímica da apoptose induzida em células HeLa S-3 pela cicloheximida e o fator de necrose tumoral (TNF-alfa)

Aicha Marceline Sarr José Ernesto Belizário

2001

Localização: ICB - Inst. Ciências Biomédicas    (T-ICB BMF QV4 S247a 2001 ) e outros locais(Acessar)

  • Título:
    Avaliação morfológica e bioquímica da apoptose induzida em células HeLa S-3 pela cicloheximida e o fator de necrose tumoral (TNF-alfa)
  • Autor: Aicha Marceline Sarr
  • José Ernesto Belizário
  • Assuntos: FARMACOLOGIA
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
    Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
  • Descrição: Neste estudo, a apoptose induzida pela combinação TNF-a e cicloheximida em células do carcinoma de cérvix HeLa-S3 foi investigada pelos seguintes métodos: 1) exame morfológico de núcleos corados com Hoescht 32558, em microscopia de fluorescência, 2) quantificação e análise do conteúdo de DNA pela citometria de fluxo com a coloração com iodeto de propídio, 3) análise da fragmentação do tipo escada do DNA genômico através da eletroforese em gel de agarose, 4) ensaios de quantificação da atividade proteolítica das enzimas caspases -2, -3, -6, -8 e -9. Na seqüência, utilizou-se vários ensaios bioquímicos para investigar a expressão de todas as proteínas celulares, isto é, o proteoma, através da eletroforese uni e bi-dimensional, seguida pela investigação da expressão da proteína retinoblastoma pelo método de western-blotting, utilizando os anticorpos monoclonais de camundongos IF-8, Ab-6 e o anticorpo policlonal de coelho C-15 que reconhecem diferentes porções da retinoblastoma humana. Conclui-se que a apoptose induzida pela combinação CHX + TNFa em células HeLa-S3 está associada com ativação das enzimas caspases -2, -3, -6, -8 e -9, as quais promovem a degradação de várias proteínas celulares, incluindo a proteína retinoblastoma
  • Data de criação/publicação: 2001
  • Formato: 79 p.
  • Idioma: Português
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