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Caracterização de Mutantes de Xanthomonas citri Gerados por Disrupção Gênica Randômica Usando Transposon

Garcia, Julio Cesar Levano

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química 2003-02-06

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Caracterização de Mutantes de Xanthomonas citri Gerados por Disrupção Gênica Randômica Usando Transposon
  • Autor: Garcia, Julio Cesar Levano
  • Orientador: Silva, Ana Claudia Rasera da
  • Assuntos: Bactérias Anaeróbicas Gram-Negativas (Estudo); Parasitos De Plantas; Mutação (Biologia); Transposon; Xanthomonas (Estudo); Fitopatologia; Disrupção Gênica; Pcr Touchdown; Plant Pathology; Plant Parasites; Mutation (Biology); Gram-Negative Anaerobic Bacteria (Study); Gene Disruption; Xanthomonas (Study)
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: Xanthomonas axonopodis pv citri (Xac), uma bactéria gram negativa, é a causadora da doença Cancro Cítrico que ocasiona enormes prejuizo na citricultura brasileira. Com o seqüenciamento do genoma deste patógeno foram encontradas inúmeras sequências codificadores com funções desconhecidas. Assim com a finalidade de estudos funcionais do genoma de Xac, foram gerados mutantes randômicos usando o transposon EZ::TN, que induziu disrupção aleatoria de seus genes com o intuito de avaliar que genes inativados afetam a patogenicidade da bactéria. Para o mapeamento do local de inserção do transposon foi desenvolvida uma metodologia baseada na técnica de PCR touchdown utizando oligonucleotídeos semidegenerados. A confiabilidade deste novo método foi comprovada através do mapeamento por Southem blot de alguns mutantes. Conseguiu-se mapear 90 mutantes randômicos com este método. Os testes de patogenicidade em citros mostraram mutantes com sua patogenicidade afetada observando-se variações nos sintomas da doença. Mutantes interessantes contendo uma ORF hipotética inativada ou tendo uma inserção num espaço intergênico foram achadas, sendo também detectados alguns mutantes com nocaute de genes nos seus plasmídeos pXac33 e pXac66.
  • DOI: 10.11606/D.46.2018.tde-10052018-155618
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química
  • Data de criação/publicação: 2003-02-06
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português

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