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Caracterização e expressão de dois genes codificando ATPases do tipo P em Blastocladiella emersonii

Fietto, Luciano Gomes

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química 2001-03-23

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  • Title:
    Caracterização e expressão de dois genes codificando ATPases do tipo P em Blastocladiella emersonii
  • Author: Fietto, Luciano Gomes
  • Supervisor: Gomes, Suely Lopes
  • Subjects: Atpase Tipo P; Biologia Molecular; Blastocladiella; Microbiologia; Microrganismos; Molecular Biology; Microorganisms; Microbiology; P-Type Atpase
  • Notes: Tese (Doutorado)
  • Description: A TPases do tipo P são proteínas integrais de membrana que usam a energia química contida na molécula de ATP para o transporte de cátions através de membranas. O nosso trabalho apresenta a clonagem e o sequenciamento de um gene (BePAT2) e a caracterização da expressão de dois genes (BePAT1 e BePAT2) codificando isoformas de uma ATPase do tipo P no fungo aquático Blastocladiella emersonii. As proteínas codificadas por estes genes, surpreendentemente se mostraram mais similares às Na+/K+ e H+/K+-ATPases de eucariotos superiores do que a outras ATPases de fungos. Experimentos de \"Northern blot\", imunoprecipitação e \"Western blot\" demonstraram que as ATPases (BePAT1 e BePAT2) são diferencialmente expressas durante o desenvolvimento de B. emersonii. Os resultados obtidos mostraram que o aumento da transcrição dos genes refletiu em um aumento da síntese e do acúmulo das ATPases, sugerindo um controle pré-traducional da expressão de BePAT1/2. Estudos de formação de fosfoenzima na presença de diferentes íons e inibidores, utilizando as enzimas imunopurificadas, sugerem que as proteínas codificadas por estes genes tenham uma atividade semelhante às Na+/K+-ATPases. Os nossos resultados de expressão e atividade mostram pela primeira vez, evidências da funcionalidade de genes codificando uma proteína similar às Na+/K+-ATPases em um eucarioto inferior.
  • DOI: 10.11606/T.46.2019.tde-23012019-100954
  • Publisher: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Química
  • Creation Date: 2001-03-23
  • Format: Adobe PDF
  • Language: Portuguese
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