skip to main content
Primo Advanced Search
Primo Advanced Search Query Term
Primo Advanced Search prefilters

Avaliação in vitro da formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de indivíduos diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose

Domingues, Pedro Castania Amadio

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto 2021-03-11

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Avaliação in vitro da formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de indivíduos diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose
  • Autor: Domingues, Pedro Castania Amadio
  • Orientador: Watanabe, Evandro
  • Assuntos: Biofilmes; Candidíase Bucal; Diabetes Mellitus; Saliva; Biofilms; Candidiasis; Oral
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: É notório o papel do diabetes mellitus como fator de risco para o desenvolvimento de doenças bucais, como a candidíase bucal, cárie e a periodontite. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar a formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose. Trata-se de um estudo experimental laboratorial in vitro, em três etapas. Etapas um e dois, de obtenção e identificação de 48 cepas de Candida spp., sendo que 32 de C. albicans e 16 de C. glabrata, com auxílio da técnica de PCR. Ainda, a etapa três, de processamento microbiológico, com a avaliação da capacidade de formação de biofilme por três ensaios distintos: I) determinação do número de unidades formadoras de colônia (UFC/mL); II) matéria seca dos biofilmes; III) taxa de crescimento de biofilme em fundo de placa de poliestireno. Inicialmente, objetivando simular as características observadas in vivo, o fundo das placas de cultivo recebeu 400 µL de saliva humana para formação da película adquirida. Decorrida a incubação a 37 °C por 24 h, a saliva foi descartada e cada poço de cultura recebeu suspensão padronizada das leveduras (106 UFC/mL) em Saubouraud Dextrose Broth sem suplementação e com suplementação de glicose a 2 e 10 mg/mL, e as placas foram incubadas a 37 °C por 48 h. Para avaliação do número de UFC/mL, o biofilme aderido foi coletado, diluído seriamente e cultivado em placas de Petri com Sabouraud Dextrose Agar. Após incubação os resultados foram expressos em log UFC/mL. Para a avaliação da matéria seca, a solução remanescente foi liofilizada e mensurada em balança de precisão. A taxa de crescimento de biofilme foi avaliada por microscopia Operetta CLS High Content e o FilmTracer(TM) LIVE/DEAD Biofilm Viability kit, conforme o protocolo do fabricante. Posteriormente, 10 imagens por poço foram obtidas e digitalizadas com ampliação de 40 ×. A área recoberta por biofilme (µm2) das imagens foi avaliada com auxílio do software Harmony High Content Imaging. Os dados apresentaram distribuição não normal, e a comparação entre as cepas de diabéticos e não diabéticos foi realizada pelo teste U Mann-Whitney. O teste de Kruskal-Wallis one way foi utilizado para verificar diferenças entre as condições de suplementação de glicose. O nível de significância estatística adotado foi de α = 5%. Os valores de UFC/mL mostraram um maior crescimento das cepas de C. albicans dos pacientes diabéticos em relação aos não diabéticos nas três suplementações (p < 0,001). Por outro lado, acerca da matéria seca em 10 mg/mL e da taxa de crescimento de biofilme sem suplementação de glicose e a 2 mg/mL, os resultados indicaram uma formação de biofilme maior para cepas de C. albicans dos não diabéticos (p < 0,001). Em conclusão, cepas de C. albicans e C. glabrata provenientes de diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose apresentaram resultados distintos quanto à formação de biofilme, por diferentes técnicas.
  • DOI: 10.11606/D.22.2021.tde-11062021-161249
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto
  • Data de criação/publicação: 2021-03-11
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português

Buscando em bases de dados remotas. Favor aguardar.