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Determinação de propriedades mecânicas e morfologia de Schistosoma mansoni por Microscopia de Força Atômica

Carvalho, Adriane Maria De

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Física 2023-10-03

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Determinação de propriedades mecânicas e morfologia de Schistosoma mansoni por Microscopia de Força Atômica
  • Autor: Carvalho, Adriane Maria De
  • Orientador: Salvadori, Maria Cecilia Barbosa da Silveira
  • Assuntos: Schistosoma Mansoni; Microscopia De Força Atômica; Propriedades Mecânicas; Esquistossomose; Qnm; Schistosoma Mansoni; Atomic Force Microscopy; Mechanical Properties; Schistosomiasis
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: Este trabalho apresenta a utilização da Microscopia de Força Atômica (Atomic Force Microscopy AFM) para a caracterização morfológica e de propriedades mecânicas do tegumento de helmintos (vermes) de Schistosoma mansoni (S. mansoni), parasita causador da doença esquistossomose. Foram realizadas medidas por AFM em ar de amostras de S. mansoni de ambos os sexos utilizando o modo de operação PeakForce Quantitative Nanomechanical Mapping (QNM). As amostras, previamente submetidas a uma solução fixadora de estruturas morfológicas, foram aderidas ao porta-amostras de AFM, secas em estufa e submetidas à análise por AFM. A Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) foi utilizada para auxiliar na identificação da região analisada por AFM. No modo QNM de AFM uma curva de força-distância é gerada em cada ponto da varredura, e dessas curvas de força são gerados mapas de propriedades mecânicas, tais como módulo elástico e adesividade, juntamente com a imagem de morfologia 3D. Nota-se que o tegumento das vermes fêmeas apresentam sulcos com direção anelar; a profundidade desses sulcos foi medida e obtida uma média de (128 ± 10) nm. Ao analisar os mapas de propriedades mecânicas, especialmente as imagens com contraste de adesividade, observou-se a presença de um padrão composto por faixas claras e escuras. Para vermes fêmeas, a periodicidade espacial do padrão de faixas claras e escuras teve uma média de (715 ± 37) nm. Após caracterizar o helminto por esta técnica qualitativa, imagens de vermes fêmeas com contrastes em QNM de modo quantitativo foram obtidas após uma calibração. Com o modo QNM quantitativo foi possível extrair e analisar as curvas de força cruas (antes da calibração) de cada imagem com resolução de 256 x 256 pixels. As regiões analisadas através de QNM quantitativo também foram analisadas a partir da obtenção de um conjunto de curvas de força (CCF), registradas no modo contato de AFM. As curvas de força foram analisadas de forma similar, tanto as obtidas por QNM quanto por CCF, para a obtenção do módulo elástico. Os módulos elásticos de sete regiões foram obtidos para os dois casos (QNM e CCF). Esses resultados indicaram que o módulo elástico do helminto S. mansoni é da ordem de frações ou unidades de GPa. A força de adesão entre a ponta de silício e a amostra também foi analisada a partir das curvas de força obtidas por QNM quantitativo de imagens que apresentaram o padrão de faixas claras e escuras. Apesar de as forças de adesão serem consideravelmente baixas em relação à força máxima aplicada, o padrão de faixas claras e escuras permanece presente. Os resultados apresentados neste trabalho abrem possibilidades de estudos por AFM para testes de eficácia de fármacos contra S. mansoni, avaliando alterações biomecânicas nesses helmintos induzidas por agentes antiparasitários, através de comparações com vermes de controle.
  • DOI: 10.11606/D.43.2023.tde-23102023-092114
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Instituto de Física
  • Data de criação/publicação: 2023-10-03
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português

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