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Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli.

Gomes, Fernanda Resende

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia 2010-06-22

Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.

  • Título:
    Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli.
  • Autor: Gomes, Fernanda Resende
  • Orientador: Ho, Paulo Lee
  • Assuntos: Rhg-Csf; Granulócitos Citoplasmáticos; Granulócitos (Humano); Genética Bacteriana; Fatores Biológicos; Expressão Heteróloga; Corpos De Inclusão; Escherichia Coli; Rhg-Csf; Inclusion Body; Heterolog Expression; Granulocytes Cytoplasmic; Granulocytes (Human); Bacterial Genetics; Biological Factors
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Notas Locais: Programa Interunidades em Biotecnologia EP/FMVZ/IPT/IB/ICB/I. BUTANTAN;Nome do Programa Interunidades no site do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
  • Descrição: O Fator estimulador de colônias de granulócitos humano recombinante (rhG-CSF) produzido em Escherichia coli é uma proteína não glicosilada com 175 aminoácidos, de grande importância clínica para o tratamento de neutropenias. O presente trabalho propõe a construção de dois sistemas de expressão em E. coli, um sistema para obtenção do rhG-CSF no citoplasma e outro para secreção da proteína recombinante no meio de cultura utilizando a sequência sinal da L-asparaginase II. Os dois sistemas de expressão foram testados e comparados. A partir desses dados, passou-se para as etapas de obtenção do rhG-CSF com o sistema de expressão sem a sequência sinal. As etapas de renaturação e purificação foram eficientes obtendo-se uma proteína com adequado grau de pureza, integridade estrutural e atividade biológica. Essa proteína também foi utilizada com sucesso para a produção de anticorpos policlonais em camundongos. Com os resultados obtidos, a proteína rhG-CSF mostrou-se viável para estudos posteriores em bioreatores e produção em escala-piloto.
  • DOI: 10.11606/D.87.2010.tde-13082010-163827
  • Editor: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia
  • Data de criação/publicação: 2010-06-22
  • Formato: Adobe PDF
  • Idioma: Português
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  • Realização: ABCD-USP USP   Logos de Redes Sociais: Freepik

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