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Caracterização da expressão de microRNAS em carcinoma de mama triplo negativo

Calvano Filho, Carlos Marino Cabral

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Faculdade de Medicina 2014-07-22

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  • Title:
    Caracterização da expressão de microRNAS em carcinoma de mama triplo negativo
  • Author: Calvano Filho, Carlos Marino Cabral
  • Subjects: Micrornas; Neoplasias De Mama Triplo Negativas/Genética; Neoplasias De Mama Triplo Negativas/Diagnóstico; Neoplasias Da Mama/Patologia; Prognóstico; Marcadores Biológicos De Tumor/Análise; Imuno-Histoquímica; Reação Em Cadeia Da Polimerase Em Tempo Real; Neoplasias De Mama Triplo Negativas/Patologia; Genes Supressores De Tumor; Expressão Gênica; Carcinoma Ductal De Mama/Patologia; Carcinoma Ductal De Mama/Genética; Triple Negative Breast Neoplasms/Pathology; Triple Negative Breast Neoplasms/Genetics; Prognosis; Triple Negative Breast Neoplasms/Diagnosis; Real-Time Polymerase Chain Reaction; Breast Neoplasms/Pathology; Micrornas; Immunohistochemistry; Genes Tumor Suppressor; Gene Expression; Carcinoma Ductal Breast/Pathology; Carcinoma Ductal Breast/Genetics; Tumor Markers Biological/Analysis
  • Notes: Dissertação (Mestrado)
  • Description: INTRODUÇÃO: Os microRNAs (miRNAs) são uma classe de pequenas moléculas não codificadoras de proteínas que regulam a expressão gênica durante a etapa de tradução. Esta regulação é feita pelo pareamento de bases com o mRNA-alvo (RNA mensageiro), resultando na supressão da tradução ou na clivagem do mRNA. A depender se os miRNAs têm como alvo genes supressores de tumor ou oncogenes, eles podem atuar como supressores tumorais ou oncogenes. A imunoistoquímica triplo negativa, no câncer de mama, é, comumente, utilizada como substituto clínico para identificação dos tumores basaloides, que se caracterizam pela expressão de genes epiteliais basais, sendo associados a menores taxas de sobrevida livre de doença e sobrevida global. O câncer de mama triplo negativo faz com que seja necessária a descoberta de marcadores moleculares que possam servir de alvos terapêuticos ou, pelo menos, que sirvam como marcadores preditivos da resposta aos quimioterápicos. OBJETIVO: avaliar a expressão de microRNAs, por PCR em tempo real, no carcinoma mamário ductal invasivo (CDI) triplo negativo. MÉTODOS: Foram avaliados materiais em parafina de tumor de 31 pacientes com as seguintes características: carcinoma invasivo de mama, receptores de estrogênio e de progesterona negativos e HER 2 negativo, bem como tecido mamário histologicamente normal. Foram utilizados kit para extração de RNA de amostras fixadas e parafinadas - miRNeasy FFPE; kit para síntese de cDNA - miScript II RT; kit miScript SYBR Green PCR e miScript miRNA PCR Arrays para análise de 84 sequências de miRNA de câncer humano. Foram avaliados dados clínicos, como idade, paridade, amamentação, status menopausal; variáveis histológicas, como tamanho do tumor, status linfonodal, invasão linfática; características imunoistoquímicas, como expressão de Ki-67, EFGR e CK 5/6. O seguimento das pacientes buscou verificar a ocorrência e o tempo de aparecimento de recidiva loco regional, metástase à distância e óbito. Para análise estatística foi utilizado o software miScript miRNA PCR Array Data Analysis, que utiliza o método de quantificação relativa DeltaCt. RESULTADOS: A análise comparativa dos 31 casos de CDI triplo negativo com os 18 casos de parênquima mamário normal definiu microRNAs hiperexpressos, sendo eles: miR-96-5p (fold-regulation(FR) = 9,68, p = 0,000008), miR-21-5p (FR = 4,47, p = 0,00), miR-7-5p (FR = 5,8, p = 0,00137) , miR-182-5p (FR= 7,92, p = 0,000001), miR-210-3p (FR = 11,83, p = 0,000048), miR-18a-5p (FR = 9,51, p = 0,000034), miR-155-5p (FR= 4,40 , p = 0,00019) e miR-93-5p (FR= 4,15, p = 0,000023). Aponta, ainda, microRNAs com hipoexpressão, a saber: miR-204-5p (FR = -10,26, p = 0), miR-205-5p (FR= -4,07, p = 0,019822), miR-125b-5p (FR= -4,29, p=0) e let 7c-5p (FR= -4,91, p=0). CONCLUSÃO: a expressão de microRNAs no carcinoma ductal invasivo triplo negativo permite diferenciá-lo do tecido normal
  • DOI: 10.11606/D.5.2014.tde-29102014-165054
  • Publisher: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Faculdade de Medicina
  • Creation Date: 2014-07-22
  • Format: Adobe PDF
  • Language: Portuguese
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