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Obtenção de anticorpos monoclonais humanos antitetânicos.
Aliprandini, Eduardo
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia 2015-08-12
Acesso online. A biblioteca também possui exemplares impressos.
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Título:
Obtenção de anticorpos monoclonais humanos antitetânicos.
Autor:
Aliprandini, Eduardo
Orientador:
Boscardin, Silvia Beatriz; Moro, Ana Maria
Assuntos:
Anticorpos Monoclonais Humanos
;
Tétano
;
Separação Single Cell
;
Plasmablastos
;
Linfócitos B De Memória
;
Toxina Tetânica
;
Memory B Cells
;
Plasmablasts
;
Single Cell Separation
;
Human Monoclonal Antibodies
;
Tetanus
;
Tetanus Toxin
Notas:
Tese (Doutorado)
Notas Locais:
Programa Interunidades em Biotecnologia EP/FMVZ/ IPT/IB/ICB/I. BUTANTAN
Descrição:
Anticorpos monoclonais (AcMos) para uso terapêutico correspondem a uma área importante na indústria de biofármacos, em especial os AcMos humanos, que apresentam menor probabilidade de elicitar imunogenicidade. O objetivo deste trabalho consistiu em obter AcMos humanos antitetânicos através da separação de linfócitos B produtores de anticorpos específicos utilizando o antígeno ou de plasmablastos. As células foram coletadas de doadores após vacinação e separadas por equipamento de cell sorter. As regiões variáveis dos anticorpos foram amplificadas e clonadas em vetores de expressão, que foram usados para transfectar transitoriamente células HEK293-F. O uso da toxina tetânica conjugada independentemente com dois marcadores, biotina e Alexa Fluor® 647, possibilitou a separação específica de linfócitos B produtores de AcMos antitetânicos, que foram avaliados por ELISA, western blotting e pela inibição da ligação da toxina ao gangliosídio GT1b. O ensaio in vivo mostrou proteção total dos animais contra a toxina tetânica quando três AcMos foram usados em conjunto.
DOI:
10.11606/T.87.2015.tde-04122015-141425
Editor:
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia
Data de criação/publicação:
2015-08-12
Formato:
Adobe PDF
Idioma:
Português
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