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Caracterização da isoforma 4 do permutador na/h em células T84

G. A. R. Beltran M. A Ramirez; Y Hiraki; Gerhard Malnic; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE (20. 2005 Águas de Lindóia, SP)

Resumos Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2005

Águas de Lindóia, São Paulo Federação de Sociedades de Biologia Experimental 2005

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  • Título:
    Caracterização da isoforma 4 do permutador na/h em células T84
  • Autor: G. A. R. Beltran
  • M. A Ramirez; Y Hiraki; Gerhard Malnic; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE (20. 2005 Águas de Lindóia, SP)
  • Assuntos: FISIOLOGIA
  • É parte de: Resumos Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2005
  • Notas Locais: Disponível somente em CD-ROM
  • Descrição: Objetivo: Avaliar através de abordagens funcionais e moleculares a presença da isoforma 4 do permutador Na/H (NHE4) em células T84. Métodos e Resultados: O pH intracelular foi medido em monocamadas de células utilizando BCECF e um microscópio de fluorescência invertido. Alem disso, foram sintetizados primers para NHE4 humano, para detectar o mRNA desta isoforma em células T84 por RT-PCR. Alem disso, medimos o volume celular através de microscopia confocal. O RT-PCR mostrou a presença de mRNA para a hNHE4 nas células T84. NHE4 foi avaliada na presença de HOE 694(25µM-inibe NHE 1-2) apos o pulso acido. Nestas condições o fluxo de hidrogênio(JH+) foi de 1,59±0,11mM/min;n=18 vs Controle=3,68±0,14mM/min;n=33). Quando substituimos o Na+ por gluconato de K+, observamos um aumento da velocidade de recuperação do pHi (Na+=0,060±0,065;n=6 vs K+=0,080±0,0059;n=6 pHi/min), efeito não observado em células PS120, transfectadas com NHE1(Na+=0,16±0,026;n=7 vs K+=0,064±0,015;n=6 pHi/min). Em solução sem Cl-, observamos um aumento do JH+ de NHE4 quando comparado com seu controle (0Cl+HOE=2,28±0,076;n=10 vs HOE=1,58±0,21mM/min;n=8). Este efeito foi observado também na presença de 1mM de furosemide, um inibidor do cotransporte Na/K/2Cl, e foi inibido na presença de 10µM NPPB, um inibidor de canais de cloreto. ) O aumento da atividade de NHE4 foi devido a redução em 20%±1,4,n=9 do volume celular quando as células foram expostas a solução sem Cl- e de 12%±2,4;n=10 na presença de
    furosemide, sendo que a inibição dos canais de Cl- impede esta redução de volume. As células foram expostas a soluções com diferentes osmolaridades(Hipo=100; Iso=290 e Hiper=350mOsm/l). Assim, observamos ativação de NHE4 durante incubação com solução hipertônica e inibição em a solução hipotônica, quando comparadas ambas com a solução isotônica (Hipo=0,60±0,07;n=6; Iso=1,59±0,1;n=7 e Hiper=2,78±0,16;n=6 mM/min). Conclusões: Células T84 expressam NHE4 que participa de forma importante na regulação do pHi e volume celular.
  • Editor: Águas de Lindóia, São Paulo Federação de Sociedades de Biologia Experimental
  • Data de criação/publicação: 2005
  • Formato: res. 28.010.
  • Idioma: Português
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