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Papel da proteína Kinase C e do cálcio citosólico na velocidade de extrusão de H+ das células MDCK

Maria Oliveira-Souza M. S Pelinson; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE (20. 2005 Águas de Lindóia, SP)

Resumos Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2005

Águas de Lindóia, São Paulo Federação de Sociedades de Biologia Experimental 2005

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  • Título:
    Papel da proteína Kinase C e do cálcio citosólico na velocidade de extrusão de H+ das células MDCK
  • Autor: Maria Oliveira-Souza
  • M. S Pelinson; Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE (20. 2005 Águas de Lindóia, SP)
  • Assuntos: FISIOLOGIA
  • É parte de: Resumos Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2005
  • Notas Locais: Disponível somente em CD-ROM
  • Descrição: Objetivo: Avaliar o efeito da interação da Angiotensina II (ANG II), Phorbol 12-myristate 13-cetate (PMA; estimulador da PKC) estaurosporina (inibidor da PKC) ou dimethyl-BAPTA/AM (quelante de Ca2+ i), sobre o pH intracelular (pHi) e a distribuição das isoformas alfa (_) e epsilon (_) da PKC em células MDCK. Métodos e Resultados: As medidas de pHi são realizadas por microscopia de fluorescência, utilizando a sonda intracelular fluorescente, BCECF/AM. A distribuição das isoformas de PKC e investigada por imunofluorescência e analise por microscopia confocal, utilizando anticorpos específicos para cada isoforma. A velocidade de extrusão celular de H+ (dpHi/dt) nos 2 primeiros minutos apos o pulso acido com NH4Cl, quando as células são expostas ao meio controle e [0.184 ± 0.009 (50) unidades de pH/min]. Este parâmetro e aumentado com ANG II (10-12, 10-9 ou 10-7 M) e não e alterado com ANG II (10-6 M). Ambos efeitos moduladores da ANG II sobre a dpHi/dt são reduzidos por estaurosporina ou dimethyl-BAPTA/AM (10-5 M). O PMA (10-7 M) aumenta a dpHi/dt, sendo esse efeito reduzido por estaurosporina. Nos estudos de imunofluorescência, encontramos que, na condição basal, há maior intensidade fluorescente (IF) da PKC_ no citosol, e da PKC_ no núcleo. Na vigência de ANG II (10-9 M), a IF para PKCZ e aumentada, tanto no citosol como na membrana plasmática; porem, a IF para a PKC_ desloca-se do núcleo para o citosol. Na vigência de ANG II (10-6 M), a IF da PKC_
    desloca-se para a região perinuclear e, a da PKC_, e redirecionada para o núcleo. Conclusões: Nossos resultados indicam que nas células MDCK, tanto as isoformas _ e _ da PKC, como o Ca2+ i, são fatores reguladores da modulação de ANG II na extrusão de H+, apos carga acida por NH4Cl
  • Editor: Águas de Lindóia, São Paulo Federação de Sociedades de Biologia Experimental
  • Data de criação/publicação: 2005
  • Formato: res. 26.002.
  • Idioma: Português

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