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Isolamento e caracterização bioquímica de componentes do veneno de Tityus serrulatus com ação sobre o sistema complemento estudos in vitro e in vivo

Daniela Trinca Bertazzi Eliane Candiani Arantes Braga

2003

Localização: FCFRP - Fac. Ciên. Farm. Ribeirão Preto    (Bertazzi, Daniela Trinca )(Acessar)

  • Título:
    Isolamento e caracterização bioquímica de componentes do veneno de Tityus serrulatus com ação sobre o sistema complemento estudos in vitro e in vivo
  • Autor: Daniela Trinca Bertazzi
  • Eliane Candiani Arantes Braga
  • Assuntos: ESCORPIÕES; VENENOS (ESTUDO IN VITRO); BIOQUÍMICA
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: Foram investigados o efeito de veneno Tityus serrulatus (VTs) e suas toxinas sobre a atividade lítica do sistema complemento (SC) in vivo e in vitro. O processo de purificação dos componentes ativos do VTs envolve basicamente uma cromatografia de troca iônica CM- celulose de pH 7,8. A TsTX-I (fração XIII) foi obtida em uma simples etapa cromatográfica. A fração IX foi recromatografada em CM- celulose de pH 4,7 porque mostrou efeitos significantes sobre a atividade lítica do soro in vitro e in vivo. Soro humano ou de rato foi pré-incubado por diferentes períodos ou concentrações do VTs em ensaios in vitro. O VTs causou diminuição da atividade lítica da via clássica (VC) e via alternativa (VA). A incubação de VTs com soro humano modificou o perfil eletroforético de C3, em imunoeletroforese bidimensional, detectado com anti-C3 humano. Os efeitos de todas as frações obtidas da cromatografia do veneno sobre a atividade lítica do SC foram investigados. As frações I, II-III, V, VI, VII-VIII e TsTX-I demonstraram uma diminuição da atividade para VC e as frações I, II-III, IV, V, VI, VII- VIII, IX e X para VA. As frações IX e IX-4 induziram diminuição da atividade sobre a VA de soro humano ou de rato e mudou a migração eletroforética de C3 que foi similar ao padrão típico da ativação induzida pelo zimosan. Estes resultados indicam que o VTs e frações reduzem a atividade lítica do soro inibindo ou ativando e consumindo os componentes do SC durante o período de pré-incubação. A
    imunoeletroforese suporta esta hipótese, pois a ativação de C3 envolve a atividade proteolítica , e alteração de migração eletroforética. O VTs ou fração IX não apresenta atividade lítica sobre eritrócitos. Os experimento in vivo foi realizado usando VTs, frações e toxinas. A atividade lítica da VC e VA foram determinados em soros de ratos injetados i.p. com VTs (150 µg/kg) , frações (150 µg/kg) , TsTX-I (150 µg/kg) , ... ou salina (controle). Os animais foram sacrificados 0,5, 1, 2, 4, 24 e 48 hrs após injeção de VTs, após 24 hrs frações e 1 e 24 hrs após TsTX-I. O efeito observado foi bifásico com valores máximos em 1 e 24 hrs após injeção do veneno. Efeitos semelhantes foram obtidos para TsTX-I, mas com menor intensidade. As frações V, IX aumentaram a atividade da VC e as frações IX, X e XI aumentaram a atividade da VA. A subfração IX-4 aumentou a atividade da VC e VA. Valores de hematócrito de todos animais testados foi determinado para avaliar o efeito da hemoconcentração sobre a atividade lítica do SC. Foi observado que os valores máximos de hematócrito foi obtido 1 hr após injeção e retomou a valores normais dentro de 24hrs. Estes dados indicam que a hemoconcentração pode determinar um papel relevante no primeiro pico da atividade do complemento, mas nos não podemos descartar uma ação direta do veneno sobre o SC durante este período, desde que a concentração do veneno é máxima de 15 a 30 min após envenenamento. A atividade lítica
    dos soros de ratos injetados com veneno, fração IX, TsTX-I ou salina foi abolido quando os soros foram previamente adsorvidos com zimosan. Estes dados confirmam que o aumento da atividade lítica induzida pelo veneno ou toxinas é dependente do SC. Estes resultados demonstram que o SC está envolvido no processo inflamatório induzido pelo veneno ou TsTX-I e conseqüentemente no edema pulmonar, hemólise, leucocitose, entre outras manifestações clínicas do envenenamento grave.
  • Data de criação/publicação: 2003
  • Formato: 158 p. + anexos.
  • Idioma: Português
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