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Os microRNAs miR-450a-5p e miR-28-5p atuam na diferenciação de células tronco da polpa dentária humana

Milena Chales Pereira Geraldo Aleixo Silva Passos

2015

Localização: FMRP - Fac. Medicina de Ribeirão Preto    (Pereira, Milena Chales )(Acessar)

  • Título:
    Os microRNAs miR-450a-5p e miR-28-5p atuam na diferenciação de células tronco da polpa dentária humana
  • Autor: Milena Chales Pereira
  • Geraldo Aleixo Silva Passos
  • Assuntos: CÉLULAS-TRONCO; POLPA DENTÁRIA; DIFERENCIAÇÃO CELULAR; TRANSCRIÇÃO GÊNICA
  • Notas: Dissertação (Mestrado)
  • Descrição: As células tronco são definidas como células capazes de autorrenovação e diferenciação em diferentes tipos celulares mais especializados. Dentre os tipos de células tronco adultas, as mesenquimais são as que possuem maior capacidade de diferenciação e plasticidade celular, sendo capazes de atravessar barreiras das linhagens celulares e se diferenciar pelo menos em osteoblastos, adipócitos ou condrócitos. Além disso, podem ser isoladas de uma ampla variedade de tecidos, incluindo a polpa dentária. As células tronco imaturas da polpa dentária representam uma fonte prática dessas células. Porém todo o conhecimento a respeito da diferenciação dessas células é ainda fragmentário, pois apesar de muitos estudos revelarem sobre os mecanismos moleculares durante o processo de cada cascata de diferenciação, muitas perguntas permanecem sem resposta. Por exemplo, quais são os mecanismos genéticos moleculares transcricionais e pós transcricionais que ocorrem durante a diferenciação celular. Como importantes reguladores a nível pós transcricional, os microRNAs (rniRNAs) são capazes de regular rigidamente a diferenciação celular e reprimir a tradução de mRNAs alvos, gerando mudanças significativas na expressão gênica. Dada a grande versatilidade de interações dos miRNAs com diferentes alvos de mRNAs e considerando observações já feitas por nosso grupo de que os miRNAs miR-450a-5p e miR-28-5p estão envolvidos na regulação da diferenciação de células tronco mesenquimais em osteoblastos, supomos que eles também podem atuar num conjunto maior de alvos envolvendo outros destinos de diferenciação, tal como a adipogênese ou condrogênese. Para testar tal hipótese, usamos um sistema modelo experimental no qual células tronco imaturas da polpa dentária foram induzidas in vitro à diferenciação osteoblástica, transfectadas com miRNAs mimics (oligos sense que são idênticos aos
    miRNAs) do miR-450a-5p ou miR-28-5p e submetidas à análise de expressão transcricional de mRNAs utilizando a tecnologia de microarrays. As interações entre os miRNAs miR-450a-5p ou miR-285p e mRNAs alvos relacionados às vias de diferenciação celular, tais como adipogênese ou condrogênese, foram analisadas utilizando o algoritrno RNAhybrid e a ocorrência dessas interações no meio intracelular foram avaliadas pelo ensaio da luciferase. Os resultados encontrados evidenciam que, durante a diferenciação osteoblástica de células tronco imaturas da polpa dentária humana, os miRNAs miR-450a-5p e miR-28-5p atuam em mRNAs alvos envolvidos com outros destinos de diferenciação como a adipogênese e a condrogênese. Descobrimos que os mRNAs ACAN e KLF5, genes relacionados à diferenciação das células tronco mesenquimais em condrócitos ou adipócitos, respectivamente, são alvos potenciais tanto do miR-450a-5p quanto do miR-28-5p e, portanto, estariam sob o controle pós transcricional desses miRNAs. Nossos achados contribuem para a melhor compreensão da regulação pós transcricional exercida por esses dois miRNAs na diferenciação das células tronco mesenquimais.
  • Data de criação/publicação: 2015
  • Formato: 162 p apêndices.
  • Idioma: Português
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