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Comparação de três protocolos distintos para extração de RNA de amostras fixadas em formalina e emblocadas em parafina

Gisele Rodrigues Gouveia Suzete Cleusa Ferreira; Ester Cerdeira Sabino; Sheila Aparecida Coelho Siqueira; Juliana Pereira

Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial Rio de Janeiro v. 47, n. 6, p. 649-654, 2011

Rio de Janeiro 2011

Localização: FM - Fac. Medicina    (BCBIB )(Acessar)

  • Título:
    Comparação de três protocolos distintos para extração de RNA de amostras fixadas em formalina e emblocadas em parafina
  • Autor: Gisele Rodrigues Gouveia
  • Suzete Cleusa Ferreira; Ester Cerdeira Sabino; Sheila Aparecida Coelho Siqueira; Juliana Pereira
  • Assuntos: EXPRESSÃO GÊNICA; PARAFINA; PATOLOGIA MOLECULAR; BIOLOGIA CELULAR; RNA (ANÁLISE); ESTUDOS RETROSPECTIVOS; CÉLULAS (MORFOLOGIA); AMPLIFICAÇÃO DE GENES
  • É parte de: Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial Rio de Janeiro v. 47, n. 6, p. 649-654, 2011
  • Descrição: Introdução: Tecidos fixados em formalina e emblocados em parafina (FFEP) são importantes fontes de amostras para estudos retrospectivos. Apesar de sua capacidade de preservação de proteínas e morfologia celular, a formalina interfere negativamente em testes de biologia molecular por fragmentar e modificar quimicamente os ácidos nucleicos, particularmente o ácido ribonucleico (RNA). Objetivo: Comparar a eficiência de três diferentes protocolos de extração de RNA para análise de expressão gênica de tecidos FFEP. Material e métodos: Amostras de linfonodo humano FEEP foram submetidas à extração de RNA utilizando-se os kits Ambion e Arcturus Bioscience e o método clássico de Trizol. Após a extração, o RNA foi quantificado e testado quanto à sua capacidade de amplificação pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) utilizando primers do gene endógeno gliceraldeído-3 fosfato desidrogenase (GAPDH). Discussão/conclusão: Todos os protocolos testados produziram quantidades adequadas e suficientes de RNA total, entretanto, somente os protocolos com uso dos kits Ambion e Arcturus produziram RNA capaz de ser amplificado pela PCR
  • Editor: Rio de Janeiro
  • Data de criação/publicação: 2011
  • Formato: p. 649-654.
  • Idioma: Português
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