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Comparison of different methods for exogenous DNA uptake by bovine spermatozoa

Renata Simões Weber Beringui Feitosa; Marcella Pecora Milazzotto; Alessandra Corallo Nicacio; Flávia Regina Oliveira de Barros; José Sérgio de Arruda Gonçalves; Mariana Groke Marques; José Antônio Visintin; Mayra Elena Ortiz D'Ávila Assumpção

Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science São Paulo v. 52, n. 1, p. 78-86, 2015

São Paulo 2015

Localização: FMVZ - Fac. Med. Vet. e Zootecnia    (VIS - 190 )(Acessar)

  • Título:
    Comparison of different methods for exogenous DNA uptake by bovine spermatozoa
  • Autor: Renata Simões
  • Weber Beringui Feitosa; Marcella Pecora Milazzotto; Alessandra Corallo Nicacio; Flávia Regina Oliveira de Barros; José Sérgio de Arruda Gonçalves; Mariana Groke Marques; José Antônio Visintin; Mayra Elena Ortiz D'Ávila Assumpção
  • Assuntos: BOVINOS; EMBRIÃO DE ANIMAL; ESPERMATOZOIDES ANIMAL; TRANSFERÊNCIA DE GENES
  • É parte de: Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science São Paulo v. 52, n. 1, p. 78-86, 2015
  • Notas: Disponível em:<http://dx.doi.org/10.11606/issn.1678-4456.v52i1p78-86>. Acesso em: 14 abr. 2015
  • Notas Locais: Na FMVZ, ver acervo: Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 52, n. 1, p. 78-86, 2015;Na FMVZ, ver acervo: VIS-190 Documento Digital
  • Descrição: Apesar da manipulação genética de animais domésticos ser de grande interesse para a produção animal e para a indústria farmacêutica, a sua eficiência ainda é insatisfatória. A injeção pronuclear, a técnica mais utilizada para tal propósito, principalmente em camundongos, ainda apresenta limitações para esta espécie. Algumas alternativas têm sido desenvolvidas como o uso de espermatozoides como vetores para transferência gênica, na qual a célula espermática tem habilidade espontânea de se ligar à molécula de DNA e internalizá-la. Dado o potencial da transferência gênica mediada por espermatozoide para animais domésticos transgênicos, o objetivo do presente trabalho foi a avaliação de quatro métodos de incorporação de DNA para a transferência gênica mediada por espermatozoides na espécie bovina: incubação com DNA, alteração da membrana plasmática induzida por cálcio ionóforo seguida por incubação com o DNA exógeno, eletroporação e lipofecção. Espermatozoides não expostos ao DNA exógeno foram usados como grupo controle. Os índices de clivagem, blastocisto e eclosão foram avaliados, respectivamente, as 72 horas após a inseminação dos oócitos, bem como, aos 9 e 12 dias de cultivo embrionário. Os embriões positivos para o DNA exógeno foram avaliados por PCR. Nenhum efeito de tratamento foi observado nos índices de clivagem, blastocisto e eclosão. Além disso, a porcentagem de blastocistos positivos para o DNA exógeno não diferiu entre os grupos experimentais. Apesar do baixo número de embriões positivos para DNA exógeno, os resultados obtidos mostram que todos os tratamentos apresentaram eficiências similares. A conclusão obtida foi que, apesar de os índices de desenvolvimento embrionário terem sido similares e constante em todos os grupos experimentais, outros fatores como a sequência, o tamanho e a concentração do DNA exógeno devem
    ser avaliados para melhorar a transferência gênica mediada por espermatozoides
  • Editor: São Paulo
  • Data de criação/publicação: 2015
  • Formato: p. 78-86.
  • Idioma: Inglês
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